1.细胞起源:
细胞简称 T84
细胞别称 T-84; T 84
细胞背景描述 T84细胞是从一位72岁男性结肠癌患者的肺转移灶建立的可移植人类癌细胞株;肿瘤组织皮下接种于BALB/c裸鼠,并连续进行移植。在裸鼠身上的移植过程中,细胞株始终保持结肠癌的原始组织性状。在无胸腺小鼠中传代23代后建立了T84细胞。T84细胞单层生长到饱和并在接触细胞间展现出紧密连接和桥粒,有很多关于多肽类激素和神经递质并维持定向电解质传输的受体。T84细胞展现了接触细胞中的紧密连接和桥粒,角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
供体年龄 男
组织来源 器官:结肠; 疾病:结直肠癌;取材转移灶:肺
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 1
2.培养及保藏:
完全培养基 DMEM/F12(PM150312)+5% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤
1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 2~3分钟
传代比例(密度) 1:2-1:4
换液频次 2~3次/周
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。