NCI-H446 [H446](人小细胞肺癌细胞)
1.细胞起源:
细胞简称 NCI-H446 [H446]
细胞别称 H446; H-446; NCI-446; NCIH446
细胞背景描述 NCI-H446细胞是从一位小细胞肺癌患者的胸水中建立的,NCI-H446细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。NCI-H446细胞是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元特有的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶。NCI-H446细胞内左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。C-myc DNA序列扩增约20倍,c-myc RNA比正常细胞增加15倍。最初,传代培养基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氢化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml铁传递蛋白、10nM 17-β雌二醇、30nM亚硒酸钠)。
供体年龄 男;61岁
组织来源 肺;转移灶:肋膜渗出癌;小细胞肺癌
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生长特性 半贴半悬
生物安全等级 1
2.培养及保藏:
完全培养基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤
1、该细胞为半贴壁半悬浮细胞,悬浮细胞是活细胞,可用离心管收集细胞悬液后,于1200 rpm(250g左右)离心收集细胞;
2、部分贴壁不牢的细胞可直接吹起使之悬浮;
3、贴壁较牢固的细胞可用PBS润洗后,在培养瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培养箱中消化,待细胞变圆收缩后可用4~6 mL左右完全培养基进行终止消化,轻轻吹散细胞后离心搜集细胞;
4、将悬浮的细胞和贴壁的细胞收集到一起混匀后按比例接种到新的培养瓶。
消化时间 1~2分钟
传代比例(密度) 1:3-1:4
换液频次 2~3次/周
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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