1.细胞起源:
细胞简称 NCI-H596
细胞别称 H596; H-596; NCI-HUT-596; NCIH596
细胞背景描述 NCI-H596细胞是1983年由Gazdar·A·F和Oie·H从一名患有肺腺鳞癌的73岁白人男性患者的胸壁肿物中分离得到;肿块的获取先于治疗。NCI-H596细胞表达与正常肺组织水平相当的p53,没有大的结构DNA的异常。NCI-H596细胞角蛋白和波形蛋白阳性,神经丝三联蛋白阴性;NCI-H596细胞表达多种鳞状细胞分化标志,如谷氨酰胺转移酶活性、被膜素的产生和交联包膜的形成。
供体年龄 男;73岁
组织来源 肺
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 1
2.培养及保藏:
完全培养基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤 1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
传代比例(密度) 1:3-1:4
换液频次 2~3次/周
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。