应用
Pepstatin A 适合用于:荧光基质金属蛋白酶测定中抑制剂混合物组织匀浆过程中作为蛋白酶抑制剂提取细胞过程中作为蛋白酶抑制剂胃蛋白酶抑制剂 A 滴定法测定组织蛋白酶 D 的摩尔浓度抑制组织蛋白酶 D它可与E64-d和Leupeptin A合用,用于抑制自噬体内自噬底物的降解。对于该应用,工作浓度通常在1-10μM之间。
生化/生理作用
胃酶抑素 A 是酸性蛋白酶(天冬氨酰基肽酶)的抑制剂。它可与蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶 D、牛凝乳酶和蛋白酶 B(黑曲霉)形成 1:1 的复合物。该抑制剂具有高度的选择性,不会抑制硫醇蛋白酶、中性蛋白酶或丝氨酸蛋白酶。可溶性 γ-分泌酶和逆转录病毒蛋白酶也可被胃酶抑素 A 抑制。它已用于鉴定多种来源的蛋白酶。
单位定义
1u 相当于使胃蛋白酶活性降低 1u 的抑制剂的量(1u 相当于在 pH 2.0 和 37℃ 下每分钟使 280 nm 处的吸光度增加 0.001 的酶的量(血红蛋白,货号 51290,作为底物的,最终体积 16 mL));如上所述的10′000吸光度约相当于 ~1 Bergmeyer-U(当 1 胃蛋白酶-U 为在pH 2.0 和 37℃ 下每分钟水解 1 μg/l 乙酰-L-苯丙氨酰-3,5-二碘-L-酪氨酸的酶时)
制备说明
胃蛋白酶抑制剂能够以1 mg/ml溶于含10%(v/v)乙酸的甲醇溶液(甲醇:乙酸比例9:1)中。使用甲醇或DMSO溶解该肽时,乙酸可能是必需的。它能够以1-2 mg/ml溶解在乙醇中,但可能需要加热才能完全溶解。胃蛋白酶抑制剂溶液可以加热至最高60℃而不会导致肽分解。1 mg/ml储备溶液可在4℃下稳定保存至少一周。溶剂为甲醇或DMSO的1 mM溶液可在-20℃下稳定保存数月。如果溶液变成深黄色,则表示试剂水解。工作浓度为1μM的溶液可在室温下稳定保存至少一天。
Sigma-Aldrich西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司
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