服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 型号 |
罗斯河病毒PCR检测试剂盒 | 50T | EY00P1010 |
组成及试剂配制
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
![4.png 4.png](https://www.chemicalbook.com/SupplyImg/2022-12-14/6380662532758413472732568.jpg)
实验外包
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
BT-549细胞,癌细胞 白鲢尾鳍细胞,SCF细胞 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸氮卓斯汀质量规格:度>98%,BR,可用于细胞培养Azelastine HCl
A3(T细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸氮卓斯汀(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Azelastine HCl
HAoAF Pellet 主动脉外膜成纤维细胞团块 > 1 mio.cells 表皮色素细胞-深色素裂解物HELM-d L阿奇霉素质量规格:945-1030 ug /mg,二水物Azithromycin
CL-0202Saos-2(骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2阿奇霉素(标准品)质量规格:效价测定Azithromycin
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na)质量规格:>99%,BR5'-AMP-Na2
Y-27632.2HClY27632质量规格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 选择性抑制剂 人肌红蛋白(MYO/MB)试剂盒 Human Myoglobin ELISA Kit 人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
灵芝酸A(标准品)Ganoderic A质量规格:HPLC≥95%,标准品 RatcoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 小鼠腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)试剂盒 Mouse Adenosylhomocysteinase,AHCY ELISA kit
蝙蝠葛苏林碱(标准品)Daurisoline质量规格:≥96%,标准品 10倍1酸平衡盐(PBS)缓冲溶液500毫升 大肠杆菌通用型(EC-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
外消旋噻吗洛尔-d5 马来酸盐rac Timolol-d5 Maleate质量规格:美国进口 MouseCompleme3,C3ELISA试剂盒小鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒规格:96T/48T HumanSalusinαELISA试剂盒人Salusin-αELISA试剂盒规格:96T/48T
罗斯河病毒PCR检测试剂盒酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)质量规格:>98% (HPLC),BCZymosan A from Saccharomyces cerevisiae ELISAKitAQP-0人水通道蛋白0规格:48T/96T 人抗着丝点抗体(ACA)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA ELISA Kit
硫酸钙(>99%,BR)质量规格:>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous 小鼠成纤维细胞生长因子13(FGF13)ELISA试剂盒 ,英文名: FGF13 ELISA Kit Ratferritin,FEELISA试剂盒大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二环己基碳二亚胺(>99%,BR)质量规格:>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA检测试剂盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 96T/48T HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA试剂盒人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丁二酸二甲酯(>99%,BR)质量规格:>99%,BRDimethyl succinate 大鼠1酸激活谷氨酰胺酶(PAG)试剂盒 Rat phosphate activated glaminase,PAG ELISA kit HumanhepatitisBvirusXieractingprotein,HBXIPELISAKit人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
使用方法:
一、样品DNA的制备用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
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