产品名称 : BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品简介
BCA蛋白浓度检测是一个实验，是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明
一. 微孔酶标仪法
1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积 BCA试剂A 加1体积 BCA试剂B（50:1）配制成 BCA工作液，充分混匀 (混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温 24 小时内稳定。
2. 稀释标准品：取 10μL BSA 标准品用 PBS 稀释至 100μL（样品一般可用 PBS 稀释），使终浓度为 0.5mg/ml。将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 μL加到 96 孔板的蛋白标准品孔中，加 PBS 补足至 20μL。
3. 将样品作适当稀释（多做几个梯度，如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释），加 20μL到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
4. 各孔加入 200μL BCA 工作液，37℃放置 15-30 分钟。用酶标仪测定 A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果
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