该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组ICAM-1/CD54浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ICAM-1/CD54抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人ICAM-1/CD54会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ICAM-1/CD54抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ICAM-1/CD54抗体与结合在包被抗体上的人ICAM-1/CD54结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ICAM-1/CD54浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中ICAM-1/CD54的浓度。
可检测样本中的人ICAM-1/CD54,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样
4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请最后乘以总稀释倍数(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理
9、.本试剂不同批号组分不得混用。
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艾普蒂ELISA试剂盒的优势:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型!
湖北艾普蒂生物工程有限公司
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