吖啶盐和相关化合物已被证明是非常有优势的化学发光标记物,稳定性,活性和敏感性超过了那些放射性同位素。吖啶酯(试剂盒所提供)能与任何含有氨基的蛋白发生反应(见图1)。在碱性条件下,NHS将会离去,吖啶酯将会以一个稳定的酰胺键与蛋白质结合形成吖啶化合物。反应完成后,多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。在存在碱性过氧化氢,吖啶标记的蛋白不需要酶催化可自行发光。加入激发试剂后,体系立即释放光子,可以用430nm标准光度计检测。这个发光过程是十分短暂(整个过程的发生小于2秒),触发方案必须增加内部光度计和光子探测器。蛋白质,多肽,抗体,核酸都可以用吖啶标记。标记化合物在碱性过氧化氢的激发下快速发光,通过收集光子可以检测到标记化合物。 主要用途:化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。
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