产品简介:
Bio-FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒,具有高灵敏度和发光信号稳定的特点,可以满足高通量检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。相比于美仑辉光型FIREFLYGLO 萤光素酶报告基因检测试剂盒(MA0519),本品发光信号强度大幅度提升,有效提高了检测灵敏度,可以用于检测ADCC Reporter Bioassay或细胞中萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因的表达。
操作说明:
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数据展示:
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图1. Bio-FIREFLYGLO发光体系在光强以及线性效果对比进口P品牌(萤光素酶水平检测)。
(A)Bio-FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测试剂盒对比进口P公司,在绝对光强上赶超竞品P。(B) 单一时刻光强-Firefly萤光素酶浓度标曲线性良好(R2=0.9996)。
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图2. Bio-FIREFLYGLO发光体系在光强以及线性效果对比进口P品牌(细胞水平检测)。
(A)细胞浓度梯度光强稳定性和(B)细胞浓度-光强标曲示例。在细胞培养基环境中,原位追踪检测Firefly Luciferase发光情况。由图可知,在绝对光强上赶超竞品P;而且,单一时刻光强-细胞数标曲线性良好(R2=0.9998)。
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图3. Bio-FIREFLYGLO发光体系在不同培养基发光情况。美仑Bio-FIREFLYGLO发光体系在常用培养基如:DMEM、RPMI1640、DMEM/F12都可以正常发光,均与对照检测效果相近。
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图4:293T细胞中TNFα浓度梯度诱导NF-κB通路检测效果,Meiluncell Bio-FIREFLYGLO对比竞品P。归一化处理后,TNFα浓度梯度诱导NF-κB通路检测结果与竞品无明显差异。
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图5:使用PWL110检测萤光素酶发光情况。Jurkat-luc2p-NFAT-RE-hyg细胞经过PMA以及离子霉素药物处理,激活萤火虫萤光素酶,使用PWL110检测不同药物浓度下处理后的发光情况,计算出EC50=3.278ug/ml。
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图6:使用PWL110进行CD20抗体的ADCC效应检测。效靶细胞比例为6:1,EC50=34.76ng/ml。靶细胞为Raji,效应细胞为Jurkat-luc2p-NFAT-RE- FcγRIIIa-high affinity(V158)。
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图7:AML12细胞转染IL6-promoter-Luc荧光素酶报告基因质粒,加入LPS诱导IL-6炎症通路。Meiluncell Bio-FIREFLYGLO对比竞品P检测结果无明显差异。
保存条件:
全新试剂盒-20℃保存,一年有效;
溶解分装后的Bio-FIREFLYGLO Luciferase Substrate于-70℃避光保存一年,或-20℃短期保存不超过一个月。
运输条件:-10℃干冰运输。
注意事项:
1、检测仪器选择:能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测,但是针对相同的样品,不同检测器本底信号值和测量值均可能不同;且对于同一样本检测,不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰,推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响,所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。
4、为保证萤光素酶检测试剂稳定性,适量分装后建议-70℃长期避光保存或者短期存放于-20℃不超过一个月,并尽快使用,尽量避免多次反复冻融。
5、如需同时检测多个细胞培养板,请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致,再进行数据读取,以获得的检测结果。
关键字: 报告基因检测试剂盒;萤光素酶报告基因检测试剂盒;报告基因;单酶报告基因检测;
大连美仑生物技术有限公司,是集研发、生产、销售于一体,专业为科研机构和各大制药、试剂公司提供科研用原料药和高端实验试剂的专业供应平台。公司技术力量雄厚,生产工艺先进。拥有强大的科研团队和独立的质控中心,全部按照ICH及药典等相关规定进行检测,确保产品质量符合要求。
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