4-Butylresorcinol 是一个苯酚衍生物,可以抑制酪氨酸酶,其IC50 值为 11.27 μM。
它表明4-丁基间苯二酚(4-正丁基间苯二酚)以浓度依赖性方式显着抑制黑色素合成。此外,还发现它抑制酪氨酸酶的活性,酪氨酸酶是限速黑素酶。 4-丁基间苯二酚不诱导ERK,Akt活化或MITF降解,并且对cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化没有影响,其刺激MITF表达。 4-丁基间苯二酚强烈降低无细胞系统中的酪氨酸酶活性。此外,4-丁基间苯二酚与日扁柏醇组合显示出累加效应,降低了MITF的表达.
简言之,将Mel-Ab细胞培养在60mm培养皿中。在含有2%FBS的DMEM中与测试物质(包括4-丁基间苯二酚)一起温育4天后,用冰冷的PBS洗涤细胞,并用含有1%Triton X-100的磷酸盐缓冲液(pH6.8)裂解。然后通过冻融破碎细胞,并通过以10000×g离心5分钟澄清裂解物。在量化蛋白质水平并用裂解缓冲液调节浓度后,将90μL每种裂解物置于96孔板的孔中,然后加入10μL的10mM L-DOPA。对照孔含有90μL裂解缓冲液和10μL10mML-DOPA
Mel-Ab细胞系是源自小鼠的自发永生化黑素细胞系,其产生大量黑色素。将Mel-Ab细胞在补充有10%胎牛血清(FBS),100nM TPA,1nM CT,50μg/ mL链霉素和50U / mL青霉素的DMEM中于37℃,5%CO 2中温育。使用结晶紫测定法测定细胞活力。将细胞与测试物质一起温育24小时后,除去培养基并在室温下用0.1%结晶紫的10%乙醇溶液染色5分钟,然后用蒸馏水漂洗4次。
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杨经理