笔环肽是一种从鬼笔鹅膏中得到的有毒的环状七肽,可以与纤维肌动蛋白丝非常特异的结合,并且具有很高的亲和力。它能使肌动蛋白聚合物的临界浓度降低到小于1μg/mL,因此,常作为一种聚合促进剂使用。该物质可以被绿色荧光染料标记,从而作为标记物用于组织细胞培养、组织切片或无细胞系中的肌动蛋白标记。被Acti-stainTM 488 phalloidin标记的肌动蛋白丝其生物学特性未发生改变,包括与肌球蛋白结合的能力。
Acti-stainTM488 phalloidin呈橙色,固体,分子量1406。该化合物吸光度和荧光扫描显示分别在500nm和550nm有一吸收峰和荧光峰。其1 x 工作液即可对300-350张盖玻片的细胞进行染色。
注意:鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人,其半数致死剂量为2mg/Kg)。
图1 Acti-stainTM 488 Fluorescentphalloidin的吸光度和荧光扫描图
说明:甲醇稀释标记的鬼笔环肽,对其吸光度和激发光谱分别在250-750nm和500-750nm处扫描,吸收峰为500nm,荧光峰为550nm。
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。使用前简短离心使样品至管底,加入500μl无水甲醇配制成14μM的溶液。该溶液可在-20℃稳定保存6个月,冻干产物可以在4℃干燥环境(湿度<10%)下保存6个月。
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