中文名：Dilinoleyl DiI（细胞膜橙红色荧光探针）
英文名：Dilinoleyl DiI (cell membrane orange red fluorescent probe)
货号：D598345
包装：5mg
存储温度：2-8°C储存,避光
产品介绍：
Dilinoleyl DiI也被称为FAST DiI，与DiI有相同的吸收和发射波长。由于Dlinoleyl DiI中含有不饱和烃链，使Dilinoleyl DiI比DiI在细胞膜上的横向扩散速度更快。正是由于其这个特性，使其广泛应用于神经元组织的追踪。 Dilinoleyl DiI染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用0.1% TritonX-100透化）后，也可以很好地进行质膜染色。 以每次使用100 μL染色工作液，染色工作液浓度10 μM计算，5 mg配置为工作液大概可以用5400次。
产品参数：
Ex/Em (MeOH) = 549/565 nm
注意事项：
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。 2. Dilinoleyl DiI染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。 3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
应用范围：
细胞膜荧光染料；神经元顺行和逆行示踪；细胞长期示踪
使用方法：
1. 染色液制备
（1）配制储液：储液用无水 DMSO 或 EtOH 配制，浓度 1~10 mM。
注：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS 或 PBS）稀释储液，配制浓度为 1~10 μM 的工作液。
注：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始最优浓度的摸索。
2. 悬浮细胞染色
（1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为 1×106/mL。
（2）37℃孵育细胞 5~20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
（3）孵育结束，1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液，再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。
（4）重复步骤（3）两次以上。
3. 贴壁细胞染色
（1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，但要使表面保持湿润。
（3）在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）37℃孵育细胞 5~20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片 2~3 次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育 5~10 min，然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。
4. 结果检测
样品可在培养基中进行检测，可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。
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