产品名称
抗体快速酶切F(ab′)2制备试剂盒
产品货号
ZXLFAB-1100A
包装规格
1次/盒(0.5mgIgG/次)
预期用途
适用于人、兔、小鼠和其他物种和亚类的IgG酶切,得到F(ab')2 的片段。适用于化学发光、Elisa、免疫印迹(WB)、免疫组化、细胞学、单分子等免疫检测系统中灵敏度、稳定性、干扰、相关性等问题改善。
原理
本试剂盒采用高活性的胃蛋白酶活化物质,结合简约高效的滤过装置,选择性酶切人、兔、小鼠和其他物种和亚类的 IgG的 Fc 部分,得到保留抗原结合活性的 F(ab')2 的片段。
主要组成成分
(1)R1试剂:抗体稀释处理剂 1支
(2)R2试剂:抗体酶切缓冲液 1支
(3)R3试剂:胃蛋白酶活化物质 1支
(4)R4试剂:胃蛋白酶溶解液 1支
(5)R5试剂:酶切终止缓冲液 1瓶
(6)M1设备:滤过浓缩管 1支
下列试剂或仪器标记操作时需要,但不包含在本试剂盒中:
(1)移液器:10μL、200μL、1mL
(2)37±1℃水浴锅或培养箱
(3)震荡仪
(4)离心机
储存条件及有效期
(1)储存有效期:2~8℃条件下,有效期为12个月;
(2)R3试剂≤ -20℃保存;
(3)生产日期和使用期限:详见产品外包装标签。
方法和步骤
(1)实验前准备
1)请仔细阅读本说明书,本试剂盒可进行1次标记实验,每次标记实验的 标记量为0.5mg,可接受标记量为0.5-1mg。
2)将处于冷冻或冷藏状态的试剂盒组分提前恢复室温。
3)将R3试剂进行瞬时离心以确保固体物处于管底。
4)请打开水浴锅或培养箱,并设置工作温度为37±1℃。
5)滤过浓缩管加入0.5mL纯化水,8000 g离心5min润洗一次,收集管和滤芯内残留的纯化水倒入废液桶。
(2)标准操作方法
1)取0.5mg抗体至反应管,使用抗体稀释处理剂定容至0.5mL。
注意:如果抗体>0.5mg,仍是定容至0.5mL
2)使用移液器加入25 μL抗体酶切缓冲液,轻轻吹打或振荡混匀。
3)将R3试剂使用R4试剂溶解,震荡混匀后立即取2μL加入步骤2)中,轻轻吹打混匀;
4)用封口膜将反应管密封并置37℃±1℃孵育40min;
5)孵育结束加入30 μL酶切终止缓冲液,轻轻吹打混匀;
6)反应管内所有的液体转移至滤过浓缩管,8000 g离心5min,弃废液,滤过浓缩管内加入300 μL R1试剂,轻轻吹打混匀、离心;重复该步骤3次;
7)使用移液器连续轻轻吹打20次以充分回收标记物。将滤过浓缩管内溶液全部转移至冻存管内。此回收溶液即为酶切后的 F(ab')2 片段溶液,可根据需要进行下一步实验应用或保存。
常见问题解释
(1)哪些抗体可以使用本试剂盒进行酶切处理?
人、兔、小鼠和其他物种和亚类的 IgG。
满足以上两个条件的蛋白均能使用本试剂盒标记。若待标记物不满足以上条件,请选择本公司其他规格的标记试剂盒。
(2)本试剂盒可酶切处理多少mg抗体?
本试剂盒可进行1次酶切实验,每次酶切实验的 抗体量为0.5mg。可接受的酶切抗体量为0.5-1mg。如果需要酶切的抗体量更大,请选择本公司其他规格的酶切试剂盒。
(3)本试剂盒标记后的蛋白储存条件?
长期保存≤-20℃;短时间内(≤7天)2-8℃保存。如有需要,请选择本公司推荐的蛋白保存液。
(4)本试剂盒酶切后F(ab')2 的片段纯化效果如何?
首先,经本公司验证,按说明书操作后抗体IgG可完全被酶切消化,因此酶切产物中IgG可忽略不计。酶切产物包括F(ab')2 片段、大量 Fc小肽片段和少许的胃蛋白酶,其中通过滤过装置处理后,大量 Fc小肽片段和少许的胃蛋白酶可被大部分去除,得到纯度较高的F(ab')2 片段。如果酶切的抗体量比较大的、条件允许的情况下,建议使用凝胶纯化系统进行纯化。
(5)如有其他问题请联系本公司技术支持。
注意事项
(1)使用前请仔细阅读本说明书。如有疑问请先与技术支持确认后开始实验。
(2)请在通风良好的实验室内使用本试剂盒。
(3)使用本试剂盒进行实验产生的废液请及时密封、处理。
(4)本试剂盒供科学研究领域的专业人员使用。
(5)本试剂盒仅供实验室研究使用,不得用于临床诊断或临床ZL,不得用于食品或药品,不得储存在普通民房住宅内。
(6)使用本试剂盒时,请穿实验服并佩戴口罩和一次性手套。
基本信息
无锡子晓生物科技有限公司
Wuxi ZIJOY Biotechnology Co., Ltd
地址:无锡市惠山区智慧路1号4号楼
技术支持:2076028640@qq.com
订货热线:17200902831
*本试剂盒仅供实验室研究使用!
本公司供应抗体蛋白快速标记试剂盒目录
→ 碱性磷酸酶(ALP)快速标记试剂盒
→ 过氧化物酶(HRP)快速标记试剂盒
→ 荧光快速标记试剂盒
→ FITC快速标记试剂盒
→ 藻红蛋白(PE)快速标记试剂盒
→ 别藻蓝蛋白(APC)快速标记试剂盒
→ 藻蓝蛋白(PC)快速标记试剂盒
→ Alexa Fluor(AF)快速标记试剂盒
→ PerCP快速标记试剂盒
→ 生物素快速标记试剂盒
→ 链霉亲和素快速标记试剂盒
→ 抗体还原试剂盒
→ 抗体酶切消化试剂盒
→ 磁珠/微球快速标记试剂盒
→ 细胞增值与凋亡试剂盒
关键字： 抗体酶切;抗体消化;抗体F(ab′)2制备;抗体Fc片段去除;胃蛋白酶切;
无锡子晓生物科技有限公司致力于打造高端预制化免疫检测产品和服务生态链。用科学和技术改变免疫检测的方式，从而让免疫检测研发者提升工作效率、让免疫检测使用者改善操作体验。产品和服务覆盖免疫检测试剂、抗体蛋白快速标记试剂盒、Elisa和化学发光检测试剂盒、医学科研实验合作与外包、免疫检测试剂定制开发等系列。
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公司使命：提高免疫检测的质量
公司愿景：有免疫检测的地方就有我们的产品。
公司价值观：责任、尊重、公正、诚实、自信