产品名称：人皮肤黑色素瘤细胞SKMEL2
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
人皮肤黑色素瘤细胞SKMEL2收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
人皮肤黑色素瘤细胞SKMEL2培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
人皮肤黑色素瘤细胞SKMEL2分相关细胞如下：
YS1257 NCIN87 人胃腺癌细胞NCIN87
YS1258 NCIN87/LUC 人胃腺癌细胞NCIN87/LUC
YS1259 ncm460 人正常结肠上皮细胞ncm460
YS1260 NK92 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK92
YS1261 NK92MI 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK92MI
YS1262 NOZ 人胆囊癌细胞NOZ
YS1263 NP69 人鼻咽黏膜上皮细胞NP69
YS1264 NPCHK1 人鼻咽癌细胞系NPCHK1
YS1265 Nthyori31 人甲状腺正常细胞Nthyori31
YS1266 OCM1A 人眼膜络黑色素瘤细胞OCM1A
YS1267 ONS76 人脑髓母细胞瘤细胞ONS76
YS1268 OSRC2 人肾癌细胞OSRC2
YS1269 OVCAR3 人卵巢腺癌细胞OVCAR3
YS1270 P53R 人结直肠癌细胞P53R
YS1271 Panc0327 人胰腺癌细胞Panc03.27
YS1272 Panc0504 人胰腺癌上皮细胞Panc05.04
YS1273 Panc1005 人胰腺癌细胞Panc10.05
YS1274 PANC1 人胰腺癌细胞PANC1
YS1275 PATU8988t 人胰腺癌细胞PATU8988t
YS1276 PATU8988S 人胰腺癌细胞PATU8988S
YS1277 PC3 人前列腺癌PC3
YS1278 pc9 人肺腺癌细胞pc9
YS1279 PC9gr 人肺癌细胞耐吉非替尼PC9/GR
YS1280 PL45 人胰腺导管腺癌细胞PL45
YS1281 PLCPRF5 人肝癌细胞PLCPRF5
YS1282 QSG770 人正常肝细胞QSG770
YS1283 Raji 人淋巴瘤细胞Raji
YS1284 RAMOSRA1 人B淋巴瘤细胞RAMOSRA1
YS1285 RBE 人肝胆管癌细胞RBE
YS1286 RD 人胚胎性横纹肌肉瘤细胞RD
YS1287 REH 人急性非B非T淋巴细胞白血病细胞REH
YS1288 RKO 人结肠腺癌细胞RKO
YS1289 RL952 人子宫内膜癌细胞RL952
YS1290 RPMI8226 人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226
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