中文名：DNase I
英文名：DNase I
纯度：医药级
货号：D406460
包装：400u
存储温度：-20°C储存
产品介绍：
产品描述
在mRNA大规模生产过程中，转录结束后需要对转录模板进行去除，DNase I 可以将单链或者双链 DNA 进行同等程度的随机分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。在Mg2+条件下，DNase I可以对双链DNA进行随意剪切。
DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶 I）最初分离自牛胰脏，分子量约为 39 kD，是一种脱氧核糖核酸内切酶，可将单链或双链 DNA 同等程度进行随机分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。DNase I 水解单链或双链 DNA，其活性非常依赖于 Ca2+水平，并能被 Mg2+或 Mn2+激活。
本制品为利用毕赤酵母大规模发酵表达的 GMP 级重组 DNase I，采用药用规格原辅料生产，并严格控制宿主蛋白质残留、核酸残留等，符合 GMP 规范的产品生产与质量管理规程保障生产过程及所有原辅料可追溯。
质量要求
| 项目 |
标准 |
方法 |
| 外观 |
澄明液体 |
目视检查 |
| 可见异物 |
符合规定 |
中国药典2020版第四部第一法灯检法(通则0904) |
| pH值 |
7.0-8.0 |
中国药典2020版第四部pH值测定法(通则0631) |
| 活性 |
1.8KUml-2.2KU/ml |
004质粒DNA降解法 |
| 纯度 |
≥95% |
中国药典2020版第四部高效液相色谱法(通则0512) |
| RNA酶残留 |
293-RNA的降解不超过10% |
2U酶与293-RNA.37°C孵育1h |
| 细菌内毒素含量 |
≤10 EU/mg |
中国药典2020版第四部凝胶限度试验法(通则1143) |
| 外源性DNA残留 |
≤100 pg/mg |
荧光定量PCR法 |
| 宿主蛋白残留 |
≤50 ppm |
中国药典2020版第四部菌体蛋白残留量测定法(通则 3414) |
| 支原体检测 |
阴性 |
支原体检测试剂盒 |
| 重金属残留 |
≤10 ppm |
中国药典2020版第四部重金属检查法(通则0821) |
|
遵循以下规范生产
1.ISO 9001:2015, certified facility。
2.《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。
3.《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。
4.USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗，基因治疗和组织工程产品中的辅料。
5.USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 细胞治疗产品生产过程中细胞因子和生长因子。
6.Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生产细胞或基因治疗药物的生物来源原料。
产品用途
1.制备不含 DNA 的 RNA 样品。
2.RT-PCR 反应前 RNA 样品中，去除基因组 DNA 等可能的 DNA 污染。
3.体外 T7，T3，SP6 等 RNA 聚合酶催化的体外转录后去除 DNA 模板。
4.用于足迹法（Footprinting）分析 DNA-蛋白质相互作用。
5.与 DNA Polymerase I 一起用于切口平移。
6.二价锰离子存在条件下，使 DNA 片段化，产生 DNA 随机片段文库。
7.细胞凋亡 TUNEL 检测中部分剪切基因组 DNA 作为阳性对照。
保存体系
10 mM Tris-HCl (pH7.6); 2 mM CaCl2; 50% (v/v) Glycerol。
注意事项
1.最适 pH：7.0-8.0
2.活化剂：DNase I 需要二价阳离子以达到最大活性。
3.抑制剂：EDTA, EGTA, SDS。
4.特异性：降解 DNA 的双链特异性的核酸内切酶。
5.使用时将酶置于冰上操作，使用完毕后-20℃保存。
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关键字： DNase I;DNase I
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