中文名:RNase抑制剂(RNasin)
英文名:RNase Inhibitor(RNasin)
纯度:40U/μl
货号:R292575
包装:1ml
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品说明
本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成 1:1 复合体,对RNase表现高度的非竞争性抑制,本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
产品内容
RNase Inhibitor(RNasin)(40U/μl)
纯度
1)300U的RNasin和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2)300U的RNasin和 1μg的Closed circμlar(RFI)pBR322 DNA 在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3)100U的RNasin和 1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
4)SDS-PAGE:在分子量64KDa处是单一带。
应用
1)cDNA 合成反应;
2)多核糖体的分离(Polysome isolation);
3)体外翻译(In vitro translation);
4)SP6 或 T7 RNA 聚合酶的体外转录
5)体外无细胞系统转录(In vitro transcription with cell-free extract)。
使用注意
1)抑制活性的 pH 值范围较广,在 pH7~8 时表现最大活性;
2)起泡或强烈搅拌(Vortex 等)会引起失活;
3)不抑制 RNase H 活性。
使用例
cDNA 第一条链的合成。
在微量离心管中配制下列反应液,全量为20μl
试剂 | 使用量 | 终浓度 |
Total RNA or Poly(A)RNA | 1-5μg | — |
5×MMLV RT Buffer | 4μl | 1× |
dNTP Mixture(25mM ) | 0.4μl | 0.5mM |
Oligo dT or Random Primer (20μM) | 1μl | 1μM |
RNasin(40U/μl) | 1μl | 2U/μl |
MMLV Reverse Transcriptase(200U/μl) | 1μl | — |
超纯水 | Up to 20μl | — |
总体积 | 20μl | — |
1) 轻搅拌。
3) 室温下10min放置后,移入42℃温槽中。
4) 42℃保温1小时。
4) 把样品移入冰中冷却2min。
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关键字: RNase抑制剂(RNasin);RNase Inhibitor(RNasin)
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