中文名:2×常规PCR预混液
英文名:Taq-Plus PCR Master Mix (2x)
纯度:2×
货号:T295072
包装:1ml、5ml、5ml
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品简介
Taq-Plus PCR Master Mix (2x) 的浓度为 2×,使用方便快捷,能减少 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量 Taq-Plus PCR Master Mix (2x),加入模板和引物,并加入 ddH2O 补足体积,使反应体系浓度为 1× 即可进行 PCR 反应。 该 Mix 最长可扩增 5 kb DNA 片段,具有良好的扩增特异性和模 板兼容性,PCR 产物 3' 端带 A 碱基,纯化后可直接用于 T/A 克隆。
使用方法
1. 常规 PCR 反应体系
![](https://aladdin-for-icloud-store.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/private/product_template/295072/T295072_ms-1.png?access_token=a4985c10-95fc-470d-892f-e395bf93d068)
a. 引物推荐终浓度为0.2~0.4μM,效果不佳时可以在0.1~1μM 浓度范围内进行调整;
b. 不同模板最佳反应浓度有所不同,以 50μl体系为例:模板为基因组 DNA 时, 一般推荐的使用量为10~400ng;当模板为质粒或病毒DNA时,一般推荐的使用量为
10pg~20ng。
2. 常规 PCR 反应程序
![](https://aladdin-for-icloud-store.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/private/product_template/295072/T295072_ms-2.png?access_token=ab74b8b2-9727-4de0-a5d2-1726cbb4437d)
a. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应,对于一些复杂模板,例如:菌液、菌落(尤其是酵母)的PCR 扩增,预变性时间可适当延长至10 min,以提高预变性效果;
b. 关于延伸速率,当目的片段长度不超过 2 kb 时,推荐使用30 sec/kb;当目的片段长度大于 2 kb 时,推荐使用 60 sec/kb。
注 :
如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板,建议目的片段长度不超过 2.5 kb,若
超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。
质量控制
核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。
核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37℃温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。
稳定性测试:室温存放一周,无明显活性改变。
功能检测:以质粒 DNA 和人基因组 DNA 为模板,扩增 5k 和 3k 两个片段, 30 个循环后经琼脂糖凝胶电泳检测可见目的条带。
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关键字: 2×常规PCR预混液;Taq-Plus PCR Master Mix (2x)
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