中文名:重组高热稳定DNA 聚合酶
英文名:Taq DNA Polymerase
货号:T295106
包装:1kit
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品简介
本品是94 kDa的耐热性DNA聚合酶,通过将Thermus aquaticus DNA Polymerase的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。具有5'→ 3'聚合酶活性和5'→ 3'外切酶活性,但无3'→ 5'外切酶活性。PCR产物的3'端带A,可克隆至T载体。
产品组成
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使用方法
1.建议的 qPCR 反应体系
试剂 | 使用量 | 终浓度 |
Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μl)
| 0.25 μl
| 1.25 U/50 μl
|
10×Taq Buffer for PCR
| 5 μl
| 1×
|
dNTP(10 mM)
| 1 μl
| 0.2 mM
|
正向引物(10 μM)
| 1 μl
| 0.2 μM
|
反向引物(10 μM)
| 1 μl
| 0.2 μM
|
模板 DNAa
| X μl
|
|
ddH2O
| To 50 μl
|
|
a. 不同模板最佳反应浓度有所不同,以 50 μl 体系为例:模板为基因组 DNA 时,一般使用量应在 10~400 ng;当模板为质粒或病毒 DNA 时,一般使用量应在10 pg~20 ng。
2. 常规 PCR 反应程序
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a. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应,对于一些复杂模板,例如:菌液、菌落(尤 其是酵母)的 PCR 扩增,预变性时间可适当延长至 10 min,以提高预变性效果。
注 : 如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板,建议目的片段长度不超过 2.5 kb,若 超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。
质量控制
a.核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃ 温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。
b.核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37℃ 温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。
c.宿主残留检测:将酶液中残留的核酸经 E.coli 16S rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测,E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。
d.功能检测:能有效扩增多种基因组中的单拷贝基因。
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关键字: 重组高热稳定DNA 聚合酶;Taq DNA Polymerase
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