中文名:过氧化氢酶活性检测试剂盒(紫外吸收法)
英文名:Catalase Assay Kit(UV absorption method)
纯度:100T/96S
货号:C661945
包装:1kit
存储温度:2-8°C储存,避光
产品介绍:
检测原理CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的 H₂O₂清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。H₂O₂ 在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H₂O₂,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。试剂盒组分:
需要而未提供的试剂和器材紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔(UV 板)、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水样本处理1、细菌或细胞样品:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2、组织样品:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3、血清(浆)样品:直接检测。操作步骤※正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 240nm,蒸馏水调零。2、测定前将 CAT 检测工作液在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 工作液,立即混匀并计时,记录 240nm 下初始吸光值 A1 和1min 后的吸光值 A2。计算ΔA=A1-A2。
活性计算
注意事项 如果反应液有大量气泡产生,将样本用蒸馏水稀释后再进行测定。
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