产品名称:人结肠癌细胞RKOAS451
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
人结肠癌细胞RKOAS451到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
人结肠癌细胞RKOAS451培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
人结肠癌细胞RKOAS451部分相关细胞如下:
YS1627 UPCI:SCC131 人舌头鳞癌细胞UPCI:SCC131
YS1628 SC1 人B细胞淋巴瘤细胞SC1
YS1629 CMK 人原始巨核细胞白血病细胞CMK
YS1630 U2940 人B细胞淋巴瘤U2940
YS1631 WILL2 人B细胞淋巴瘤WILL2
YS1632 /Fu97 人胃癌细胞/Fu97
YS1633 Hs766T 人胰腺癌细胞Hs766T
YS1634 RKOE6 人结肠癌细胞系RKOE6
YS1635 SW837 人结直肠腺癌上皮细胞SW837
YS1636 RKOAS451 人结肠癌细胞RKOAS451
YS1637 RMGI 人卵巢癌细胞RMGI
YS1638 MOLP8 人多发性骨髓瘤MOLP8
YS1639 JJN3 人白血病细胞JJN3
YS1640 CL11 人结肠癌细胞CL11
YS1641 CL40 人结肠癌细胞CL40
YS1642 NCIH1755 人肺癌细胞NCIH1755
YS1643 MNNGHOSCl 人骨肉瘤细胞MNNGHOSCl
YS1644 NCIH727 人肺支气管良性肿瘤NCIH727
YS1645 HSC2 人口腔鳞状肿瘤细胞HSC2
YS1646 KMS11 人骨髓瘤细胞KMS11
YS1647 WILL1 人B细胞淋巴瘤WILL1
YS1648 HARAB 人肺腺癌细胞HARAB
YS1649 SKCO1 人结直肠腺癌细胞SKCO1
YS1650 HDQP1 人乳腺导管癌细胞HDQP1
YS1651 COLO824 人乳腺癌细胞COLO824
YS1652 HCC1428 人乳腺癌细胞HCC1428
YS1653 CAL148 人乳腺癌细胞CAL148
YS1654 RCK8 人B细胞淋巴瘤RCK8
YS1655 NCIBL2009 人淋巴母细胞瘤(EBV转化)NCIBL2009
YS1656 LCLC97TM1 人大细胞肺癌LCLC97TM1
YS1657 EBC1 人肺腺癌细胞EBC1
YS1658 NCIH1373 人肺腺癌细胞stage3ANCIH1373
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