产品名称：小鼠单核巨噬细胞J774A.1
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
小鼠单核巨噬细胞J774A.1到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
小鼠单核巨噬细胞J774A.1培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
小鼠单核巨噬细胞J774A.1部分相关细胞如下：
YS1838 EL4 小鼠淋巴瘤细胞EL4
YS1839 L5178YTKclone(372C) 小鼠淋巴瘤细胞L5178YTKclone(3.7.2C)
YS1840 YAC1 小鼠淋巴瘤细胞YAC1
YS1841 SVEC410 小鼠淋巴结内皮细胞SVEC410
YS1842 Ana1 小鼠巨噬细胞Ana1
YS1843 GC1spg 小鼠精原细胞系GC1spg
YS1844 CT26/LUC 小鼠结肠癌细胞CT26/LUC
YS1845 MC38/LUC 小鼠结肠癌细胞MC38/LUC
YS1846 MC38 小鼠结肠癌细胞MC38
YS1847 CT26 小鼠结肠癌细胞CT26
YS1848 CT26WT 小鼠结肠癌细胞CT26.WT
YS1849 GL261/LUC 小鼠胶质细胞瘤GL261/LUC
YS1850 GL261 小鼠胶质细胞瘤GL261
YS1851 P19 小鼠畸胎瘤细胞P19
YS1852 B16F10/LUC 小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记B16F10/LUC
YS1853 B16 小鼠黑色素瘤细胞B16
YS1854 B16B 小鼠黑色素瘤细胞B16B
YS1855 B16F10 小鼠黑色素瘤细胞B16F10
YS1856 HT22 小鼠海马神经元细胞HT22
YS1857 MLOY4 小鼠骨样细胞MLOY4
YS1858 Sp20 小鼠骨髓瘤细胞Sp20
YS1859 Sp20Ag14 小鼠骨髓瘤细胞Sp20Ag14
YS1860 OP9 小鼠骨髓基质细胞OP9
YS1861 K7M2WT/LUC 小鼠骨肉瘤成骨细胞K7M2WT(K7M2WT)/LUC
YS1862 K7M2WT 小鼠骨肉瘤成骨细胞K7M2WT(K7M2wt)
YS1863 TM3 小鼠睾丸间质细胞TM3
YS1864 AML12 小鼠肝实质细胞AML12
YS1865 HEPA16/LUC 小鼠肝癌细胞HEPA16/LUC
YS1866 HEPA16 小鼠肝癌细胞HEPA16
YS1867 H22 小鼠肝癌细胞H22
YS1868 S180 小鼠腹水瘤细胞S180
YS1869 MLE12 小鼠肺上皮细胞MLE12
YS1870 MHS 小鼠肺泡巨噬细胞MHS
YS1871 LLC/LUC 小鼠肺癌细胞LLC/LUC
YS1872 LL2（LLC1） 小鼠肺癌细胞LL2（LLC1）
YS1873 LLC 小鼠肺癌细胞LLC
YS1874 P815 小鼠肥大细胞瘤细胞P815
YS1875 RAW2647/GFP 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞+GFPRAW264.7/GFP
YS1876 RAW2647 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7
YS1877 J774A1 小鼠单核巨噬细胞J774A.1
YS1878 L929 小鼠成纤维细胞/结缔组织成纤维细胞L929
YS1879 NCTCclone929 小鼠成纤维细胞/结缔组织成纤维细胞NCTCclone929
YS1880 C2C12 小鼠成肌细胞C2C12
YS1881 MB49 小鼠膀胱癌细胞MB49
YS1882 P388 小鼠白血病细胞P388
YS1883 RAG 小鼠肾腺癌细胞RAG
YS1884 TCMK1 小鼠肾小管上皮细胞TCMK1
YS1885 A20STR 小B细胞淋巴瘤细胞A20STR
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