产品名称：OCM1A/RFP人眼脉络黑色素瘤细胞带红色荧光
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
OCM1A/RFP人眼脉络黑色素瘤细胞带红色荧光到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
OCM1A/RFP人眼脉络黑色素瘤细胞带红色荧光培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
OCM1A/RFP人眼脉络黑色素瘤细胞带红色荧光相关细胞如下：
YS2150 RL1 大鼠肺成纤维细胞RL1
YS2151 REM 大鼠胚肌细胞REM
YS2152 RES 大鼠胚皮肤成纤维细胞RES
YS2153 PtK1 袋鼠肾细胞PtK1
YS2154 PtK2 袋鼠肾细胞PtK2
YS2155 DQSHS1 迪庆绵羊皮肤成纤维细胞DQSHS1
YS2156 Mv1lu 貂肺上皮细胞Mv1lu
YS2157 ACTK1 非洲爪蟾肾细胞ACTK1
YS2158 DogL1 狗肺成纤维细胞DogL1
YS2159 NRL2 黑化大家鼠肺成纤维细胞NRL2
YS2160 CatL2 家猫肺成纤维细胞CatL2
YS2161 CatS2 家猫皮肤成纤维细胞CatS2
YS2162 RabbitS1 家兔皮肤成纤维细胞RabbitS1
YS2163 RabbitK3 家兔肾上皮细胞RabbitK3
YS2164 GHS1 金黄地鼠皮肤成纤维细胞GHS1
YS2165 SheepL1 绵羊肺成纤维细胞SheepL1
YS2166 OA3Ts 绵羊胚胎睾丸细胞OA3.Ts
YS2167 JM 人T淋巴细胞白血病细胞JM
YS2168 MT4 人T细胞白血病细胞MT4
YS2169 HFFF2 人包皮成纤维细胞HFFF2
YS2170 801D 人大细胞肺癌细胞801D
YS2171 SnuC1 人结肠癌细胞SnuC1
YS2172 H157 人口腔鳞状上皮癌细胞H157
YS2173 H33HjA1 人淋巴瘤细胞H33HjA1
YS2174 K562AZQR 人慢性骨髓性白血病细胞(耐药株)K562AZQR
YS2175 HEL299 人胚肺成纤维细胞HEL299
YS2176 HES 人胚皮肤成纤维细胞HES
YS2177 HH8 人胚肾细胞HH8
YS2178 HEH 人胚心肌细胞HEH
YS2179 SVCT 人乳腺上皮细胞SVCT
YS2180 KPNNS 人肾上腺神经母细胞瘤（脑转移）KPNNS
YS2181 FHC 人小肠上皮细胞FHC
YS2182 TSEFB 树鼩胚胎成纤维细胞TSEFB
YS2183 GPL1 豚鼠肺成纤维细胞GPL1
YS2184 GPS5 豚鼠皮肤成纤维细胞GPS5
YS2185 GPH4 豚鼠心肌细胞GPH4
YS2186 KMML1 小白鼠肺成纤维细胞KMML1
YS2187 Sarcoma180 小鼠腹水瘤细胞Sarcoma180
YS2188 FO 小鼠骨髓瘤细胞FO
YS2189 GC2spd 小鼠精母细胞GC2spd
YS2190 P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞P388D1
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