产品名称：人滑膜成纤维细胞HFLS
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
人滑膜成纤维细胞HFLS收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
人滑膜成纤维细胞HFLS培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
人滑膜成纤维细胞HFLS部分相关细胞如下：
YS2603 HFTF 人胚胎眼Tenon＇s囊成纤维细胞HFTF
YS2604 MSC 猪骨髓间质干细胞MSC
YS2605 Ratpodocyte 大鼠肾足细胞Ratpodocyte
YS2606 HCM 人心肌细胞HCM
YS2607 Malme3M 人恶性黑色素瘤细胞Malme3M
YS2608 HCV29 人膀胱上皮细胞HCV29
YS2609 HOPC 人少突胶质前体细胞HOPC
YS2610 KM12 人结肠癌细胞KM12
YS2611 HMVEC 人微血管内皮细胞HMVEC
YS2612 KYSE270 人食管鳞癌细胞KYSE270
YS2613 Nb2 大鼠淋巴瘤细胞Nb2
YS2614 MSCs 小鼠脐带间充质干细胞MSCs
YS2615 HFLS 人滑膜成纤维细胞HFLS
YS2616 HepaRG 人肝癌细胞HepaRG
YS2617 HUASMC 人脐动脉平滑肌细胞HUASMC
YS2618 rHSC99 大鼠肝星状细胞rHSC99
YS2619 MPC83 小鼠胰腺腺泡细胞MPC83
YS2620 MNFS60 小鼠髓性白血病细胞MNFS60
YS2621 RIMEC 鼠肠粘膜微血管内皮细胞RIMEC
YS2622 U138MG 人脑神经胶质瘤细胞U138MG
YS2623 LAN1 人神经母细胞瘤细胞LAN1
YS2624 G361 人黑色素瘤细胞G361
YS2625 M21 人黑色素瘤细胞M21
YS2626 MDCCMSB1 鸡淋巴瘤细胞MDCCMSB1
YS2627 TFH 滤泡性辅助性T细胞TFH
YS2628 GCT0404 人骨巨细胞瘤细胞GCT0404
YS2629 BMUS1 牦牛皮肤细胞BMUS1
YS2630 Myla2059 人皮肤T淋巴细胞瘤细胞Myla2059
YS2631 RMC1 大鼠视网膜Muller细胞RMC1
YS2632 NF639 小鼠乳腺癌细胞NF639
YS2633 TEC 人胸腺上皮细胞TEC
YS2634 LP1 人多发性骨髓瘤细胞LP1
YS2635 PAEC 鸡动脉内皮细胞PAEC
YS2636 CMECs 大鼠心肌微血管内皮细胞CMECs
YS2637 LA4 鼠肺癌细胞LA4
YS2638 RAMSCs 大鼠脂肪间充质干细胞RAMSCs
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