包装规格:
Biotin-Protein Ligase ( 1mg/ml)
700 μl×4 vials
10×Biotin Ligase Buffer A
10 ml
10×Biotin Ligase Buffer B
10 ml
储存条件:-80℃密闭保存一年有效,低温运输。
产品概述
生物素连接酶 (Biotin Ligase、BirA、EC 6.3.4.15)能活化生物素形成生物素酰 -5'-腺苷酸,将生物素特异地转
移到生物素受体蛋白(如 AviTag 融合蛋白)上,使蛋白生物素化。
来源:
重组蛋白(Escherichia coli)
活性及纯度
Biotin-Protein Ligase 生物活性≥7,500 Units/μg
纯度>95% ,无可检测的蛋白酶活性。
酶活性单位定义
底物蛋白(多肽)浓度为 40 μM 的条件下,于 25℃孵育 12-16小时 ,将 1 pmol 蛋白(多肽)生物素化所需
的酶 量定义为一个活性单位。
储存条件
1. 干冰运送,解冻后分装,避免反复冻融;
2. Biotin-Protein Ligase 长期保存置于-80℃ , 短期内使用置于-20℃ , 频繁使用可短时置于4℃。在4℃条件下
保存三个月可保持>90% 的酶活性;
3. Ligase Buffer A、B 储存于-20℃, 可反复冻融。
反应体系示例
反应物组成
体积
10×Biotin Ligase Buffer A
2.5 μl
10×Biotin Ligase Buffer B
2.5 μl
Biotin Ligase
0.17 μl
蛋白(多肽)底物
1-5 ug
dH2O(灭菌蒸馏水)
up to 25 μl
总体积 25 μl,于 25℃孵育 12-16小时,使底物完全生物素化。
注意事项
1. 本产品的底物为 AviTag 融合蛋白。
2. 如底物蛋白(多肽)需保存在较低温度时,可适当降低反应温度并应延长酶促反应时间。
3. 氯化钠(>100 mM)、甘油(>5% W/V)、硫酸铵(>50 mM)等许多常见的缓冲液成分会抑制生物素连接酶的活性。
4. 底物中可含有 Tris(pH 8.0) , 浓度为 10 mM,不超过 50 mM。
该产品 于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、 等其他国家专门规定的特殊用途,本公司概不承担任何责任
关键字: 生物素;连接酶;Biotin Ligase BirA;
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