一、简介 His 标签蛋白(竞争法)快速检测试剂盒是基于胶体金侧向层析技术的蛋白半定量检测 试剂。主要结构由样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸、背板等组成。在层析膜上固定有金标 抗体的二抗(质控线)和带有 His-tag 的蛋白(检测线);在金标垫上固定有胶体金标记的 抗 His-Tag 的单克隆抗体。当待测样品滴加到样品垫时,通过毛细作用,液体向金标垫移动。 当不含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时,His-Tag 金标抗体随着层流移动到检测线 位置,与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合,并在检测线上形成酒红色 条带;当含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时,His-Tag 金标抗体与待测样本中的 His-Tag 蛋白发生特异性的结合,样本中含有的 His-Tag 蛋白越多,与之结合的金标 His-Tag 抗体越多,剩余的游离 His-Tag 金标抗体越少,随着层流移动到检测线位置,游离的 His-Tag 金标抗体与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合,并在检测线上形成淡淡 的酒红色条带或者不显带。当复合物移动到质控线时,His-Tag 金标抗体被包被在质控线的 金标抗体二抗所捕获,并在质控线上形成酒红色条带。通过判读层析膜上检测线和质控线是 否显色及显色的强弱,判断样品中是否存在 His-Tag 蛋白。本试剂检测下限为10ug/mL,即 当待测样品中 His-Tag 蛋白的浓度达到10ug/ml 及以上浓度时,检测线的强度会被有效的削 弱,显示出淡淡的酒红色条带或不显色。当检测样品中 His-Tag 蛋白浓度在10ug/mL 至 100ug/mL 时,检测线颜色的深浅与样品中 His-Tag 蛋白的浓度呈负相关。当样本中的 His-Tag 蛋白浓度达到100ug/ml 以上时,检测线发生消线即无肉眼可见条带出现。
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