产品名称:LU99 ATCC细胞
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
LU99 ATCC细胞细胞到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
LU99 ATCC细胞培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
LU99 ATCC细胞部分产品：
YS3746 ncih2023 NCI-H2023
YS3747 ncih2081 NCI-H2081
YS3748 ncih2106 NCI-H2106
YS3749 ncih2171 NCI-H2171
YS3750 ncih2195 NCI-H2195[H2195]
YS3751 ncih2405 NCI-H2405
YS3752 ncih2444 NCI-H2444
YS3753 ncih28 NCI-H28
YS3754 ncih64 NCI-H64[H64]
YS3755 ncih720 NCI-H720[H720]
YS3756 ncih740 NCI-H740[H740]
YS3757 ncih774 NCI-H774
YS3758 ncih835 NCI-H835
YS3759 ncih847h847 NCI-H847[H847]
YS3760 ncih854 NCI-H854
YS3761 ncih865h865 NCI-H865[H865]
YS3762 ncih889h889 NCI-H889[H889]
YS3763 ncih920h920 NCI-H920[H920]
YS3764 nm2c5 NM2C5
YS3765 nmcg1 NMC-G1
YS3766 no11 no.11
YS3767 oaw28alsobeknownas41m OAW28(alsobeknownas41M)
YS3768 oaw42 OAW42
YS3769 ocubf OCUB-F
YS3770 ocubm OCUB-M
YS3771 oe21 OE21
YS3772 omc1 OMC-1
YS3773 onda11no11 Onda11(no.11)
YS3774 oums23 OUMS-23
YS3775 ov31 OV-31
YS3776 ov56 OV56
YS3777 ov7 OV7
YS3778 ovk18 OVK18
YS3779 ovkate OVKATE
YS3780 ovmana OVMANA
YS3781 p1htr P1.HTR
YS3782 p116 P116
YS3783 p30ohk P30/OHK
YS3784 p31/Fuj P31/FuJ
YS3785 p3u1 P3U1
YS3786 p3x63ag8u1p3u1 P3X63Ag8U.1[P3U1]
YS3787 panc0203 Panc02.03
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