产品名称：人肝癌细胞huh-7(无突触)
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
人肝癌细胞huh-7(无突触)到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
人肝癌细胞huh-7(无突触)操作步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
人肝癌细胞huh-7(无突触)部分相关细胞如下：
YS3276 el4/LUC 荧光素酶标记的小鼠淋巴瘤细胞EL4/LUC
YS3277 j558/LUC 荧光素酶标记的小鼠多发性骨髓瘤细胞J558/LUC
YS3278 mbt2/LUC 荧光素酶标记的小鼠膀胱癌细胞MBT-2/LUC
YS3279 ovcar3/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的人卵巢癌细胞OVCAR3/LUC/GFP
YS3280 ccrfcem/LUC 荧光素酶标记的人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM/LUC
YS3281 mm1S/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的人多发性骨髓瘤细胞MM.1S/LUC/GFP
YS3282 jeko1/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的人套细胞淋巴瘤细胞Jeko-1/LUC/GFP
YS3283 g422/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤株G422/LUC/GFP
YS3284 mdamb468/LUC 荧光素酶标记的人乳腺癌细胞MDA-MB-468/LUC
YS3285 b16f10/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的小鼠皮肤黑色素瘤细胞B16-F10/LUC/GFP
YS3286 dld1/LUC 荧光素酶标记的人结直肠腺癌上皮细胞DLD-1/LUC
YS3287 panc02/LUC/GFP 荧光素酶/GFP标记的小鼠胰腺导管腺癌细胞PANC02/LUC/GFP
YS3288 a431/LUC 荧光素酶标记的人表皮癌细胞A431/LUC
YS3289 ctla4lg24 中国仓鼠卵巢细胞CTLA4LG-24
YS3290 4to7tgl 小鼠乳腺恶性肿瘤细胞4TO7-TGL
YS3291 kapas299 人间变性大细胞淋巴瘤细胞Kapas-299
YS3292 naml1 人慢性粒细胞白血病细胞Naml-1
YS3293 aml12/LUC 荧光素酶标记的小鼠肝细胞AML12/LUC
YS3294 a172/LUC 荧光素酶标记的人胶质母细胞瘤细胞A172/LUC
YS3295 rko/LUC 荧光素酶标记的人结肠腺癌细胞RKO/LUC
YS3296 a9/LUC 荧光素酶标记的小鼠皮下结缔组织细胞A9/LUC
YS3297 acheae1/LUC 荧光素酶标记的小鼠杂交瘤细胞抗AChEAE-1/LUC
YS3298 acheae2/LUC 荧光素酶标记的小鼠杂交瘤细胞抗AChEAE-2/LUC
YS3299 lx2/LUC 荧光素酶标记的人肝星状细胞LX-2/LUC
YS3300 hek293/LUC 荧光素酶标记的人胚肾细胞HEK-293/LUC
YS3301 hep3b217/LUC 荧光素酶标记的人肝癌细胞Hep3B2.1-7/LUC
YS3302 bv2/LUC 荧光素酶标记的小鼠小胶质细胞BV2/LUC
YS3303 caco2/LUC 荧光素酶标记的人结直肠腺癌细胞Caco-2/LUC
YS3304 kyse150/LUC 荧光素酶标记的人食管鳞癌细胞KYSE-150/LUC
YS3305 ncih23/LUC 荧光素酶标记的人非小细胞肺癌细胞NCI-H23/LUC
YS3306 colo205/LUC 荧光素酶标记的人结肠癌细胞COLO205/LUC
YS3307 emt6/LUC 荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞EMT-6/LUC
YS3308 ncih157/LUC 荧光素酶标记的人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157/LUC
YS3309 hcc1806/LUC 荧光素酶标记的人乳腺鳞状癌细胞HCC1806/LUC
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