产品名称:大鼠成纤维细胞Rat1
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
大鼠成纤维细胞Rat1收到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
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大鼠成纤维细胞Rat1操作步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
大鼠成纤维细胞Rat1部分相关细胞如下:
YS3112 PG 人巨细胞肺癌细胞PG
YS3113 MAC1 人皮肤T淋巴瘤细胞MAC1
YS3114 HSKMC 人骨骼肌细胞HSKMC
YS3115 LWRN 小鼠皮下结缔组织细胞LWRN
YS3116 IFRS1 大鼠雪旺细胞IFRS1
YS3117 S37 小鼠肉瘤细胞S37
YS3118 ZYMSVEC01 猪静脉血管内皮细胞ZYMSVEC01
YS3119 SCC154 人舌鳞癌细胞SCC154
YS3120 CG4 大鼠少突胶质前体细胞CG4
YS3121 T98 人脑胶质细胞瘤细胞T98
YS3122 MA782 小鼠乳腺癌细胞MA782
YS3123 SR786 人间变性大细胞淋巴瘤细胞SR786
YS3124 HEML 人表皮黑色素细胞HEML
YS3125 Co115 人结肠腺癌细胞Co115
YS3126 KP2 人胰腺癌细胞KP2
YS3127 hRPTC 人近端肾小管上皮细胞hRPTC
YS3128 COLO829 人皮肤黑色素瘤细胞COLO829
YS3129 CaES17 人食管癌细胞CaES17
YS3130 SEG1 人食管腺癌细胞SEG1
YS3131 OVCAR5 人卵巢癌细胞OVCAR5
YS3132 ACCM 人涎腺癌细胞ACCM
YS3133 UMUC14 人肾癌细胞UMUC14
YS3134 CNE2Z 人鼻咽癌细胞CNE2Z
YS3135 MIMVEC 小鼠肠黏膜微血管内皮细胞MIMVEC
YS3136 MUSM1 小鼠小肠平滑肌细胞MUSM1
YS3137 SNU354 人肝癌细胞SNU354
YS3138 HUCEC 人正常宫颈上皮细胞HUCEC
YS3139 C57B6L 小鼠肺成纤维细胞C57B6L
YS3140 hgf HGF人牙龈成纤维细胞
YS3141 hepg2/LUC 人肝癌细胞-荧光素酶标记HepG2/LUC
YS3142 hmscbm 人骨髓间充质干细胞/HMSC-bM
YS3143 u251/LUC 人神经胶质细胞瘤细胞带荧光素酶U251/LUC
YS3144 mc38/LUC/GFP 小鼠结肠癌细胞标记MC38/LUC/GFP
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