产品名称：小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)OSKM1
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)OSKM1到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)OSKM1培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)OSKM1部分相关细胞如下：
YS2844 RCSMC 大鼠冠状动脉平滑肌细胞RCSMC
YS2845 GOlig2 小鼠胚胎干细胞GOlig2
YS2846 LN299 人胶质瘤细胞LN299
YS2847 GT38 人胃癌细胞GT38
YS2848 GT39 人胃癌细胞GT39
YS2849 HcerEpic 人正常子宫颈上皮细胞HcerEpic
YS2850 RC92A 人前列腺癌细胞RC92A
YS2851 SLK 卡波西肉瘤细胞SLK
YS2852 HMCB 人黑色素瘤细胞HMCB
YS2853 IPEC1 猪小肠上皮细胞IPEC1
YS2854 HPCY5 人胰腺导管癌细胞HPCY5
YS2855 NEC 人食管癌细胞NEC
YS2856 OVSAHO 人卵巢癌细胞OVSAHO
YS2857 HMO6 人小胶质细胞HMO6
YS2858 SNU119 人卵巢癌细胞SNU119
YS2859 KM933 EB病毒转化的人B淋巴细胞KM933
YS2860 NCIH2591 人肺癌细胞NCIH2591
YS2861 MuM2C 人眼脉络黑色素瘤细胞MuM2C
YS2862 hCMECs 人心脏微血管内皮细胞hCMECs
YS2863 F98 大鼠胶质瘤细胞F98
YS2864 Ect1E6E7 人宫颈鳞状细胞Ect1E6E7
YS2865 Hs832Tc 人卵巢良性肿瘤细胞Hs832.Tc
YS2866 HNE1 人鼻咽癌细胞HNE1
YS2867 HcaF 小鼠肝癌细胞HcaF
YS2868 H3396 人乳腺癌细胞H3396
YS2869 HCC1588 人肺鳞癌细胞HCC1588
YS2870 DANG 人胰腺癌细胞DANG
YS2871 Anip973 人肺腺癌细胞Anip973
YS2872 HOC 人肝卵圆细胞HOC
YS2873 SVOG 人卵巢颗粒细胞SVOG
YS2874 HGE 人牙龈上皮细胞HGE
YS2875 WEHI231 小鼠B淋巴瘤细胞WEHI231
YS2876 CCCESF1 人胚胎皮肤成纤维细胞CCCESF1
YS2877 HSC1 人皮肤鳞癌细胞HSC1
YS2878 NCIH128 人小细胞肺癌细胞NCIH128
YS2879 UMC11 人肺良性肿瘤细胞UMC11
YS2880 NCIH345 人小细胞肺癌细胞NCIH345
YS2881 RAT2 大鼠成纤维细胞RAT2
YS2882 CHG5 人恶性胶质瘤细胞CHG5
YS2883 RPTECTERT1 人肾近端小管上皮细胞RPTECTERT1
YS2884 67NR 小鼠乳腺癌细胞67NR
YS2885 LoMeTccRcc 人肾透明细胞癌细胞LoMeTccRcc
YS2886 HBEpiC 人支气管上皮细胞HBEpiC
YS2887 RPMI8402 人急性T淋巴细胞白血病细胞RPMI8402
YS2888 HANK1 人NK/T细胞淋巴瘤细胞HANK1
YS2889 MFM223 人乳腺癌细胞MFM223
YS2890 SC 人急性单核细胞白血病细胞SC
YS2891 SUM52PE 人乳腺癌细胞SUM52PE
YS2892 LS123 人结肠腺癌细胞LS123
YS2893 KAT5 人甲状腺乳头状癌细胞KAT5
YS2894 SF539 人胶质瘤细胞SF539
YS2895 SKLMS1 人阴户平滑肌肉瘤细胞SKLMS1
YS2896 J774 小鼠巨噬细胞J774
YS2897 C41 人宫颈癌细胞C41
YS2898 SNU251 人卵巢内膜癌细胞SNU251
YS2899 RMabm 大鼠巨噬细胞RMabm
YS2900 SKRC52 人肾癌细胞SKRC52
YS2901 NCIH1668 人典型小细胞肺癌细胞NCIH1668
YS2902 DAKiKi 人B淋巴细胞DAKiKi
YS2903 Z310 大鼠脉络从上皮细胞Z310
YS2904 38C13 小鼠B淋巴瘤细胞38C13
YS2905 Hs819T 人骨肉瘤细胞Hs819.T
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