背景介绍
纳米抗体一种来源于骆驼科动物体内、天然缺失轻链的重链抗体可变区,分子质量只有15kDa,是常规抗体分子质量的1/10。其蛋白质晶体结构长度为4 nm,直径为2.5 nm,是目前已知分子质量最小的抗体,因此称之为纳米抗体。
相比于传统抗体(图1a),纳米抗体(图1b)的活性结合区域较长,氨基酸数量多达16~18个,且其温度稳定性及有机溶剂耐受性更强,部分还可耐受蛋白酶,也能耐受更广的酸碱范围(传统抗体仅耐受pH6~9,纳米抗体可耐受pH2~11)。基于其稳定性、穿透力等方面的优势,目前纳米抗体在疾病治疗、诊断及物质检测等领域广受关注。
图1 传统抗体与纳米抗体的对比
服务内容
辰辉创聚生物®可提供:包括抗原制备、羊驼免疫、VHH纳米抗体噬菌体文库构建、VHH纳米抗体淘选全流程服务。
项目
内容
周期
交付标准
抗原制备(可选)
Ø基因合成
Ø质粒构建
Ø表达纯化
Ø质检
2-3周
Ø1-10mg抗原蛋白
ØSDS-PAGE纯度>85%
Ø内毒素<1EU/mg
羊驼免疫
Ø免疫4次
Ø采血
Ø检测每次血清效价
Ø羊驼外周血PBMC提取
8-12周
Ø羊驼外周血PBMC
Ø提供血清效价数据
ØIgG效价达1:10^5
免疫文库构建
ØRNA提取
ØcDNA制备
ØPCR扩增纳米抗体可变区
Ø连接载体并电转化
Ø计算库容量
Ø测序验证多样性
5周
Ø库容量达到10^8~10^9
Ø细菌库
免疫文库淘选
Ø噬菌体展示淘选
ØELISA/FACS筛选
Ø测序
4周
Ø提供10株以上抗体基因序列
Ø提供抗体氨基酸序列
辰辉创聚生物®提供千亿级天然纳米抗体库快速淘选服务,最快2周内获得候选分子。
天然文库淘选
此外,辰辉创聚生物®还提供亲和力成熟、抗体人源化、重组抗体构建表达及克级生产服务,欢迎咨询。
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