| 体外 | 5,7,3'，4'-四甲氧基黄酮通过调节 IRE1α 通路保护软骨细胞免受内质网应激诱导的细胞凋亡。[Pubmed：28436754 ]2018 年 3 月;59(2):157-166.研究内质网 （ER） 跨膜传感器肌醇需求酶-1 （IRE1）α信号传导在 ER 应激诱导的软骨细胞凋亡中的作用，并确定 5,7,3'，4'-四甲氧基黄酮 （TMF） 的软骨保护活性的分子机制。
方法与结果：
在大鼠膝关节软骨中采集的软骨细胞中通过siRNA转染敲低IRE1α。IRE1α 缺乏症的软骨细胞用衣霉素 （TM） 和 TMF 给药。通过流式细胞术和 DAPI/TUNEL 染色定量软骨细胞凋亡。分别通过定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法定量mRNA和蛋白质的表达。 IRE1α缺乏显著增加TM诱导的软骨细胞凋亡率，下调促生存因子XBP1S和Bcl-2的表达，上调促凋亡因子CHOP、p-JNK和caspase-3的表达。TMF 通过激活 IRE1α 的表达来抑制 TM 诱导的软骨细胞凋亡，从而逆转了 IRE1α 缺陷导致的下游促生存和促凋亡因子的表达模式。
结论：
TMF保护软骨细胞免受内质网应激诱导的细胞凋亡的机制可能与调节内质网传感器IRE1α及其下游通路的活性有关。 同时定量分析12种具有黑素生成抑制活性的甲氧基黄酮，这些甲氧基黄酮来自小花山楠的根茎。[Pubmed：26711832 ]J Nat Med. 2016 年 4 月;70(2):179-89.来自Kaempferia parviflora Wall根茎的甲醇提取物。ex Baker （Zingiberaceae） 已显示出对茶碱刺激的小鼠 B16 黑色素瘤 4A5 细胞的黑色素生成的抑制作用 （IC50 = 9.6 μg/mL）。
方法和结果：
在先前分离的25种黄酮类化合物和3种苯乙酮类化合物（1-28）中，包括5-羟基-7,3'，4'-三甲氧基黄酮（6，IC50=8.8μM），5,7,3'，4'-四甲氧基黄酮（7,8.6μM），5,3'-二羟基-3,7,4'-三甲氧基黄酮（12,2.9μM）和5-羟基-3,7,3'，4'-四甲氧基黄酮（13,3.5μM）在内的几种成分在有效浓度下显示出抑制作用，无明显的细胞毒性。化合物6、7、12和13抑制酪氨酸酶、酪氨酸相关蛋白（TRP）-1和TRP-2 mRNA的表达，这可能是其黑素生成抑制活性的机制。此外，使用HPLC开发了提取物中12种甲氧基黄酮（1、2、4-11、13和14）的定量分析方法。以MeOH-0.1 %乙酸溶剂水溶剂体系为流动相，在ODS色谱柱（粒径3 μm，内径2.1 mm×100 mm）上，获得分离和检测这些成分的最佳条件，该方法的检测限和定量限分别为0.08-0.66 ng和0.22-2.00ng。日内和日间精度的相对标准差值分别低于0.95%和1.08%，所有黄酮类化合物的总体平均回收率为97.9-102.9%，所有校准曲线的相关系数在测试范围内均表现出良好的线性度。为了验证该协议，评估了从泰国不同地区（Leoi，Phetchabun和Chiang Mai省）收集的三种植物根茎的提取物。
结论：
结果表明，该测定具有可重复性、精确性，可用于植物材料的质量评价。 |
| 体内 | 同位素标记法和超高效液相色谱-电喷雾电离-质谱法鉴定大鼠尿液中5,7,3'，4'-四甲氧基黄酮代谢物。[Pubmed：22812915 ]农业食品化学杂志 2012 年 8 月 22 日;60(33):8123-8.5,7,3'，4'-四甲氧基黄酮 （TMF） 是从小山楠中分离出的主要聚甲氧基黄酮 （PMF） 之一，据报道具有多种生物活性，包括抗真菌、抗疟、抗分枝杆菌和抗炎活性。尽管已经报道了几项关于TMF的研究，但关于TMF代谢和TMF代谢物结构的信息尚不清楚。
方法与结果：
本研究开发了一种用于鉴定TMF代谢物的同位素标记方法。合成了三种同位素标记的TMF（5,7,3'，4'-四甲氧基[3'-D（3）]黄酮，5,7,3'，4'-四甲氧基[4'-D（3）]黄酮和5,7,3'，4'-四甲氧基[5,4'-D（6）]黄酮）并给予大鼠。收集尿液样本，采用超高效液相色谱-电喷雾电离-质谱法监测主要代谢产物。
结论：
5种TMF代谢物明确为3'-羟基-5,7,4'-三甲氧基黄酮、7-羟基-5,3'，4'-三甲氧基黄酮硫酸盐、7-羟基-5,3'，4'-三甲氧基黄酮、4'-羟基-5,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-7,3'，4'-三甲氧基黄酮。 |