探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系CEM的抗白血病作用。方法与结果:人T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系CEM体外培养。使用改良的 MTT 测定法检查冬凌草甲素对 CEM 细胞的 50% 抑制浓度 (IC50)。使用光学显微镜观察细胞形态变化。通过流式细胞术分析评估药物治疗后CEM细胞凋亡的百分比。Western blot检测AKT/mTOR、RAF/MEK/ERK、STAT5信号通路的活性水平以及Bcl-2和BAX的表达水平。冬凌草甲素对CEM细胞的生长呈时间和剂量依赖性,处理72 h后冬凌草甲素的ICs0为(7. 37± 1. 99) μmol/L。用冬凌草甲素处理的CEM细胞的细胞膜变得不锋利,其中一些已经崩解。冬凌草甲素诱导CEM细胞凋亡和0、5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素处理24 h后细胞凋亡率百分比分别为(4. 8±2. 11)%、(19.03±12.54)%、(40.27± 3.31)/和(57. 23 ± 6. 69)%。冬凌草甲素抑制mTOR,P70S6,4EBP1,RAF的激活。ERK和STAT5信号转导蛋白在CEM细胞中被组成型激活,但冬凌草甲素对AKT激酶没有抑制作用。冬凌草甲素下调抗凋亡蛋白Bcl-2水平,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论:冬凌草甲通过抑制mTOR/P70/4EBP1、RAF/ERK和STATS信号通路的激活,下调Bel-2的表达和上调BAX的表达,在CEM细胞中发挥抗白血病作用。
研究冬凌草甲素在人胰腺癌细胞PANC-1中的凋亡作用,并探讨其潜在机制。方法和结果:采用MTT法测定细胞活力。Hoechst 33342染色后通过共聚焦激光扫描显微镜测定细胞凋亡,PI染色后通过流式细胞术分析。Western blot分析JNK和p38 MAPK信号通路蛋白的调控。 用冬凌草甲素处理24小时导致细胞活力以剂量依赖性方式显着降低。IC50值为49.80 μmol/L,持续24 h。用 50 μmol/L 和 80 μmol/L 冬凌草甲素处理 24 小时后,用共聚焦激光扫描显微镜观察到典型的凋亡细胞核改变,流式细胞术分析增加了 PANC-1 细胞的凋亡率。用80 μmol/L冬凌草甲素处理可下调JNK,p38蛋白的表达,增加p-JNK,p-p38的表达。此外,80 μmol/L冬凌草甲素处理降低了细胞凋亡途径中下游蛋白Caspase-9、Caspase-3和PARP的表达,并激活了Caspase-9的裂解。结论:冬凌草甲素可通过JNK和p38 MAPK通路蛋白诱导PANC-1细胞凋亡。
神经胶质瘤是最常见的恶性颅内肿瘤。尽管有新开发的疗法,但这些疗法主要针对致癌信号,不幸的是,在人类患者和小鼠异种移植模型中,尤其是第一代疗法中,都未能提供足够的生存获益。冬凌草甲素是从中草药Rabdosia rubescens中纯化的,被认为对人类肿瘤发生具有广泛的抗癌作用。方法和结果:在这项研究中,我们系统地研究了冬凌草甲素在肿瘤生长中的作用以及人类神经胶质瘤的潜在机制。我们发现冬凌草甲素在神经胶质瘤 U87 和 U251 细胞中以剂量和时间依赖性方式抑制细胞增殖。此外,这些抗癌作用也在携带胶质瘤的小鼠模型中得到证实。此外,通过流式细胞术在冬凌草甲素介导的生长抑制中观察到 S 期的细胞周期停滞。S期的细胞周期停滞导致最终的细胞凋亡,如Hoechst 33342染色和膜联蛋白V/PI双重染色所揭示的那样。细胞凋亡可以通过线粒体方式完成。结论:总而言之,我们是第一个报道冬凌草甲素可以通过诱导细胞周期停滞和最终细胞凋亡对人类神经胶质瘤肿瘤生长产生抗癌作用的人。冬凌草甲素作为神经胶质瘤生长的关键介质的鉴定可能会增强冬凌草甲素作为神经胶质瘤治疗中的新治疗策略。
冬凌草甲素是一种从传统中草药Rabdosia rubescens中提取的ent-kaurene二萜类化合物,具有多种生物学和药学功能,已在临床上使用多年。虽然冬凌草甲素的抗肿瘤功能已被众多证据证实,但其抗癌机制尚未得到充分证明。方法与结果:本研究以胰腺癌细胞系BxPC-3为模型,通过检验其对细胞活力的影响,研究冬凌草甲素可能的抗癌机制。结果表明,冬凌草甲素以时间和剂量依赖性方式影响细胞活力。暴露于不同浓度的冬凌草甲素后,与未处理的细胞相比,BxPC-3细胞的生长速率和细胞周期停滞显著降低,表明其对增殖抑制的作用。Western blot分析的详细信号通路分析显示,低剂量冬凌草甲素处理通过上调p53和下调细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)抑制BxPC-3细胞增殖,导致细胞周期停滞在G2/M期。高剂量冬凌草甲素不仅在G2/M期阻滞BxPC-3细胞,而且在S期诱导细胞积累,可能是通过γH2AX上调和DNA损伤。结论:此外,我们的结果表明,在冬凌草甲素处理后,用碘化丙啶对细胞亚群进行染色。蛋白质定量显示,高剂量冬凌草甲素治疗后,裂解聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)表达增加,尤其是长期暴露后。伴随着 BxPC-3 细胞中失活 PARP 水平的增加,细胞凋亡引发剂 caspase-3 和 caspase-7 表达也显着增加,表明 caspase 介导的细胞凋亡导致细胞死亡。
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王玲