嘌呤霉素盐酸盐(pac基因筛选标记)/蛋白合成抑制剂/抗肿瘤活性
搜索关键词:
Puromycin 嘌呤霉素;Streptomyces alboniger 白黑链霉菌;Puromycin N-acetyl-transferaseGene Pac基因;选择性抗生素;蛋白合成抑制剂;慢病毒载体;CRISPR/Cas9系统;CAS:58-58-2;
基本介绍:
1)抗微生物谱(Antimicrobial spectrum):嘌呤霉素(Puromycin,CAS:58-58-2),来源于白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)代谢产物的一种氨基糖苷类抗生素,有效抑制革兰氏阳性菌生长,对抗酸杆菌的抑制活性相对较弱,但对革兰氏阴性菌的抑制活性更弱。还能抑制原生生物、藻类、哺乳动物和昆虫细胞的生长,一般2天内能杀死99%的细胞。
2)作用机制(Mode of action):嘌呤霉素作为氨酰-tRNA分子3’末端的结构类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸肽链中,导致肽链合成的永久终止,进而阻止蛋白质合成。
3)抗性产生机制(Mode of resistance):对嘌呤霉素的抗性来自嘌呤霉素产生菌内发现的pac基因,其表达产物嘌呤霉素N-乙酰转移酶(puromycin N-acetyl-transferase)可通过乙酰化嘌呤霉素使其失活。
常见应用:
1)基因筛选用抗生素,用来筛选和维持培养携带pac基因质粒/载体的瞬转或稳转哺乳动物细胞株,特别是慢病毒颗粒感染的细胞株;也用在CRISPR/Cas9基因编辑系统;
相关文献:Zhang WW et al, CRISPR-Cas9-Mediated Genome Editing in Leishmania donovani. MBio. 2015 Jul 21; 6(4):e00861.
2)制备嘌呤霉素溶液以进行嘌呤霉素敏感实验;
3)用作蛋白合成抑制剂,用来研究细胞分化中控制基因顺序表达和协同表达的转录调控机制。
4)抗肿瘤效应和活性(Antitumor effect and activity)
5)抗病锥虫活性(Antitrypansome Activity)
常见筛选浓度:
哺乳动物细胞:1-10 μg/ml,浓度使用宿主细胞杀灭实验(杀灭曲线)来确定;
大肠杆菌:LB琼脂培养基筛选敏感转化菌株,使用浓度为100-125μg/ml。
以下是针对一些哺乳动物细胞的筛选浓度:
基本特性:
1)化学名:3'-[α-Amino-p-methoxyhydrocinnamamido]-3'-deoxy-N,N-dimethyladenosine dihydrochloride
2)同义名:Stylomycin hydrochloride; CL 13900 dihydrochloride; P638 dihydrochloride; CL16536; NSC 3055;
3)CAS NO:58-58-2
4)分子式:C22H29N7O5·2HCl
5) 分子量:544.43 g/mol
6) 外观:白色至灰白色粉末
7) 纯度:>98% (HPLC)
8) 熔点:175-177 °C
9) 溶解性:溶于水(50mg/ml),乙醇(~1mg/ml),DMSO(~10mg/ml),PBS,pH 7.2(~10mg/ml)
10) 化学结构图:
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Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素盐酸盐
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注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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