游离胆固醇(free cholesterol, FC)含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
FC 是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素 D 等生理活性物 质的重要原料。FC 浓度可作为脂代谢的指标。
测定原理:
FC 氧化酶催化 FC 生成△4-胆甾烯酮和 H2O2,过氧化物酶催化 H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌 类化合物,在 500nm 有吸收峰,其颜色深浅与 FC 含量成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
FC 的提取:
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 试剂 一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1ml 试剂一,超声波破碎 1min(强 度 20%,超声 2s,停 1s),即 FC 待测液。
3.血清(浆)样品:直接测定。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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