全血MICRORNA提取试剂盒,microRNA Extraction Kit From Blood
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全血MICRORNA提取试剂盒

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发货地 北京
更新日期 2024-07-20

产品详情

中文名称:全血MICRORNA提取试剂盒英文名称:microRNA Extraction Kit From Blood
产品类别: 活体检测
2024-07-20 全血MICRORNA提取试剂盒 microRNA Extraction Kit From Blood 25T/RMB 活体检测

我公司的全血microRNA(miRNA)提取试剂盒提取小RNA(<200nt)具有操作步骤简单、重复性、产率较高的特点。核酸提取的成功与否、提取质量的好坏对后续实验起着至关重要的作用。使用TRIzol试剂提取总RNA,对总RNA中包含的部分小RNA进行研究,该方法的缺点是总RNA中microRNA的比例较小,同时由于mRNA的干扰,会导致后续反转录和RealTime PCR实验效率很低,很难获得理想的实验结果,且结果不可靠。Biorab在探索miRNA分子功能的过程中开发的全血miRNA提取试剂盒,通过一步上柱即可获得纯度高达98%的不含大RNA的miRNA,而且可在45分钟内完成小RNA的提取。该miRNA提取试剂盒广泛适用于冻存和新鲜的抗凝全血样本(不适用于血清和血浆),每150μl全血可获得~1μg的microRNA。

产品组成:

组分
MT0002A
MT0002B
miRNA Reagent A
7.5ml
30ml
miRNA Reagent B
10ml
40ml
miRNA 吸附柱
25套
100套
Rnase-Free TE Buffer
5ml
5ml



储存:室温可保存2年。
自备试剂:异丙醇、乙醇、75%异丙醇
注意:miRNA Reagent A溶液中含有胍盐,其具有强烈的腐蚀性,试验时请务必佩戴防护眼镜、手套、口罩等防护措施,如有皮肤接触请立即用大量清水冲洗,再另行就医。

操作方法:
1.向1.5ml EP管中加入300μl miRNA Reagent A。将150μl 抗凝全血加入到上述300μl miRNA Reagent A中,立即手腕用力震荡混合均匀。室温静置 5分钟 以充分裂解细胞。
2.向上述裂解完毕的裂解液中加入250μl miRNA Reagent B,上下颠倒混合均匀。13000rpm离心5分钟,吸取550μl上清液,转移到新的1.5ml EP管中。
3.向上述溶液中加入200μl无水乙醇,手腕用力震荡数次,室温放置 5分钟。
4.13000rpm离心10分钟,转移700μl上清液到新的1.5mlEP管中。
5.向上述溶液中加入300μl 异丙醇,手腕用力上下颠倒数次。
6.分两次将上述溶液倒入到 miRNA 吸附柱中,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。
7.向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。
8.向吸附柱中加入500μl无水乙醇洗涤一次,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。
9.吸附柱 13000rpm 空离心2分钟,去掉残留的乙醇。
10.将吸附柱放入到新 1.5ml EP管中,室温放置 2分钟,使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入30μl RnaseFree TE Buffer,室温静置 2分钟,13000rpm离心2分钟,洗脱产物即为提取的miRNA。(通常取3~5μl该产物,即可使用我司TaqMan miRNA 反转录试剂盒进行反转录反应,货号:MT0006)。

应用全血miRNA提取试剂盒(MT0002)提取全血的microRNA效果图
图例:应用全血miRNA提取试剂盒(MT0002)提取全血的microRNA。
 泳道1-3:-80℃冻存一年的全血;
 泳道4-6:新鲜抗凝全血。


常见问题:
1.本方法提取的小 RNA,95%以上为小 RNA(<200nt),有时会残留一些>200nt的RNA,通常残留的>200nt RNA不影响后续试验操作。
2.本试剂盒提取的小 RNA 由于不含 mRNA 等大分子量的RNA,因此更适合做后续反转录试验,从而进行定量试验。
3.使用本试剂盒提取的microRNA 浓度通常在50ng/μl 左右,取5~10μl即可用于电泳检测。取3~5μl即可用于我司TaqMan miRNA 反转录试剂盒进行反转录反应(货号:MT0006),通常使用我司优化的miRNA-TaqMan RealTime PCR技术(货号:MTTxxxxx)。

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公司简介

北京百奥莱博科技有限公司一家专注于生命科学研究领域的生物技术公司,坚持“质量至上,服务为本,全心全意助力生命科学”的理念,为广大用于提供稳定、可靠、专业的产品和服务支持,产品线包括分子生物学,细胞生物学,免疫检测,抗体,重组蛋白,血液制品等系列。“忙忙碌碌的平凡,铸就事业的不凡”。让我们携起手来,共同创造生命科学的蓬勃发展。
成立日期 2013-07-25 (11年) 注册资本 10.000000万人民币
员工人数 50-100人 年营业额 ¥ 100万以内
主营行业 核苷,核苷酸,寡核苷酸,抗体,细胞生物学,免疫安全,生物芯片 经营模式 工厂
  • 北京百奥莱博科技有限公司
非会员
  • 公司成立:11年
  • 注册资本:10.000000万人民币
  • 企业类型:有限责任公司(自然人投资或控股)
  • 主营产品:销售化工产品(不含危险化学品及一类易制毒化学品)、机械设备、电子产品
  • 公司地址:海淀区清河
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