定量蛋白质组学方法也可以用label-free的方法,即非标记法。非标记蛋白质组定量质谱检测的优点就是样品上机前,不需要特殊标记操作,操作非常方便,也节省了标记试剂的费用。结合使用Maxquant软件进行分析,可以做到定量检测。Maxquant软件非标记定量分析是以MS1为基础,实验证明结合Maxquant软件分析的非标记技术具有较好的定量准确性和可靠性。可以利用无标记蛋白质组学方法对各类复杂样本提取蛋白及co-IP、Pull-down等中等复杂样本进行蛋白鉴定与定量。对于复杂样本蛋白鉴定数量通常在1千个以上。
◆ 蛋白质组学非标记定量分析的特点 1. 对液相色谱串联质谱的稳定性和重复性要求较高 2. 无需昂贵的标记试剂 3. 对样本的数量无限制,克服了标记定量技术在对多个样本进行定量方面的缺陷 质谱鉴定实验流程(溶液内酶解)
使用仪器 Thermo Scientific Q Exactive, Q Exactive HF
技术优势 复杂样本蛋白和中度复杂蛋白样本均可以,如各类样本提取蛋白或相互作用的蛋白质洗脱液; 高准确性, 高灵敏度。 实验报告内容 1、差异蛋白结果(excel 列表);差异蛋白归类(GO和KEGG分析)。 2、完整的实验步骤、使用仪器、试剂来源、软件检索参数等。
样品要求
实验样本预处理及运输注意事项 为保证高质量的技术服务结果,请您参照以下说明对实验样本进行处理和保存: ⊙蛋白质溶液:定量并计算总蛋白量,密封好管口,干冰包装寄送。
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