热稳定无机焦磷酸酶纯化自重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。 P207–4 + H20 →2HP04–2。该酶在100℃加热4h仍然具有100%活性,因此可用于PCR反应,解除生成的无机焦磷酸盐对PCR的抑制,增强DNA的复制。
组分
组分名称 数量 Thermostable Inorganic Pyrophosphatase (2 U/μl) 100 μl/1 ml
活性定义
1单位指标准反应条件下:0.5ml反应体系,50mM Tricine pH8.5,1mM MgCl2和0.32mM PPi,75℃反应10 钟,每分钟催化无机焦磷酸盐生成1μmol 磷酸盐的酶量。
储存
-20℃可保存3年。
使用注意事项
(1) 该酶在多种反应Buffer中均具有活性,通常该酶在tHDA扩增、PCR、测序反应等实验中,可直接接入即可。 (2) 该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在5~50U/ml浓度调整。 (3) 该酶不可以热失活。
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