T7核酸外切酶作用于双链DNA,沿5´→3´方向催化去除5´单核苷酸,它既能从5´末端起始消化,也能从双链 DNA的切刻或缺口处起始消化。它既能降解5´磷酸化 DNA 也能降解5´去磷酸化DNA。据报道,它能沿5´→3´方向降解RNA/DNA杂交双链上的RNA或DNA,但不能降解双链或单链RNA。
单位定义
1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
组分
名称 数量 T7 Exonuclease (10 U/μl) 100 μl/1 ml 10×T7 Exo Buffer 1 ml/1 ml×5
1 单位指在50μl反应体系中,25℃条件下,30 分钟内能从双链DNA底物上催化产生1 nmol的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
储存
置于-20°C,可保存3年。
使用注意事项
1. 1×T7 Exo Buffer:50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃),25℃温育。 2. 该酶的反应温度为25°C,75°C 20min可失活。
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