描述: 活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)采用DCFH-DA探针检测活性氧。DCFH-DA是迄今为止最常用、最灵敏的细胞内活性氧检探针。本身没有荧光的DCFH-DA可穿过细胞膜进入细胞,在胞内转化生成DCFH。在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。在激发波长502 nm,发射波长530 nm附近,使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测DCF 荧光,从而测定细胞内活性氧水平。 DCFH-DA活性氧检测系统本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。需要下列等荧光检测设备之一:荧光显微镜、荧光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪。激发波长500 ± 15 nm,发射波长530 ± 20 nm,或者按照FITC荧光检测条件检测。 组成与储存:可以测定100-500个样品 (1) 0.1 ml 10 mM DCFH-DA in DMSO,-20 ºC保存。 (2) 1 ml活性氧阳性对照,4 ºC保存。
使用活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit,#C1300)显示CHO细胞内活性氧荧光。左图:正常CHO细胞;右图:CHO细胞用试剂盒配备的活性氧阳性对照处理。绿色荧光表明细胞活性氧急剧增加,并能显示其定位。
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