培养条件
培养基:DMEM/F12+10%FBS
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37℃
细胞描述
细胞名称:人脐带间充质干细胞
细胞数量:1×106个
细胞活力: >90%
代数:p1-p3代
细胞检测: 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)
细胞运输:干冰运输(冻存细胞)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。
在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中
用PBS或者生理盐水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟
然后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟
离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏方法
细胞在收到后,如果不是立刻进行实验,转移到液氮中保存。如果立刻实验,细胞在37℃水浴迅速解冻,在3分钟内完成。
超净台中准备15ml离心管一支,装入10ml培养基,然后用移液器将细胞转移到离心管中,轻轻吹打均匀。
1200转/分,离心5分钟后收集细胞
弃去上清,再加入5ml DMEM/F12+10%FBS完全培养基,转入T-25培养瓶中培养,进行后续的实验。
湖南丰晖生物科技有限公司
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