"MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 MLA-144 Cell 细胞形态特性:详见细胞说明书 623-00-7 很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题,并不是因为细胞消化最重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分 HCAEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:冠状动脉;内皮细胞 OPM-2细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HS766T细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胰腺癌;淋巴结转移;男性 ROS17/2.8细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:骨肉瘤;ACI 9935 A-427[A427]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。 MDA PCa 2b细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Granta-519细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 A-673细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NE-4C细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:神经干细胞 SNU-484细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NBL-S细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。 HSF细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SCC-4细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 COLO320HSR细胞系;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁生长;细胞背景资料:该细胞1984年建系,源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fu治疗后的腹水。 HCC94细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MDCK-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SNU-638细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 COR-L88细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 HCC 94细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:这个细胞株源自高度分化的子宫鳞癌。 HOK细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:口腔角质细胞 HaCaT细胞系;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。 3T6swiss细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MDCK细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SKG-IIIa细胞系;细胞传代方法:2x10^4 cells/ml;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CEM-SS-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 RL95-2细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:这些细胞有α角蛋白,定义明确的连接复合体,张力丝和表面微绒毛。 mESCs-11细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 H22-H8D8细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁;细胞背景资料:肝癌 NRK-49F细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肾;成纤维细胞;自发永生 NCI-H1355细胞系;细胞传代方法:每周换液2次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 AZ-521细胞系;细胞传代方法:1:4传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H128细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小细胞肺癌;胸腔积液转移;男性 HMC3细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小胶质细胞;SV40转化 PK15细胞系;细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞PCV阳性 801-D细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SGC-790细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MDA PCa 2b细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 OE-33细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NHDF细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 A427细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 ZR75-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Hep-3B[Hep3B]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HUVECs细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TGW细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:神经元细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 AtT20细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 EFM-192C细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HGMC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肾小球系膜 HBE135-E6E7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:支气管上皮细胞;HPV16转化;男性 WRL68细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚胎;肝细胞 H4-II-E-C3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪酸基转移酶;可被逆转录病毒感染;可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。 AU-565细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:乳腺癌;胸腔积液转移;女性 ESC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:表皮干细胞 LIXC-004细胞系;细胞传代方法:1:3传代,3-4天传1次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Capan-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:多边形;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HCC 94细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:这个细胞株源自高度分化的子宫鳞癌。 AtT20细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BC-024细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 COLO320HSR细胞系;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁生长;细胞背景资料:该细胞1984年建系,源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fu治疗后的腹水。 SNU475细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌;男性 HUH-7.5细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌;男性 OCI-AML2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:急性髓系白血病;男性 CCRF-CEM [CCRF CEM]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;女性 EC9706细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 KASUMI-1细胞系;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满;细胞形态特性:原粒细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLA-144细胞:长臂猿淋巴瘤细胞 RCSMC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:冠状动脉平滑肌 OPM-2细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HepG2[HepG2]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 293 AAV细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 KMBC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胆管癌;男性 SUP-T1细胞系;细胞传代方法:2-3天换液1次;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BHK-21[C-13]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HCC-15细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SW480 [SW-480]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠腺癌;男性 KTA-7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺腺癌 L5178-R细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HRC99细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:直肠腺癌 HDF-n细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HepG2[HepG2]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 ECA109细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:1973年建系,来自人食管中段鳞癌组织,小块法原代培养建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。 Cates-1B细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 M14细胞系;细胞传代方法:1:3传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:混合生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 "
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