mRNA提取试剂盒产品及特点 构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常 常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾 巴,所以可以通过与Oligo(dT)的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离 开。其原理如下: mRNA提取试剂盒本产品具有下列特点: 1. 直接从总RNA中提取mRNA,即开即用,非常方便。 2. 处理量大,一次可以处理10 μg 总RNA。 3. 操作简单,只需要离心就可以完成,免去了灌柱、洗柱等麻烦。 4. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。 使用及效果 将0.5 mL结合液加入到一管装有1 mg Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5 分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA 100 μL加热到65℃ 5分钟后加入等 体积的结合液,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后 将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL结合液,混匀后4℃ 200 g 离心5分钟, 小心弃上清。重复上步洗3-5次,用RNase-free水洗脱mRNA,用微量核酸沉淀 剂沉淀回收mRNA。
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