Hi-five|昆虫细胞

"Hi-five|昆虫细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态特性：详见细胞说明书

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

Hi-five Cell

14208-83-4

一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)

C8-D1A细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：该永生化细胞系源自出生8天小鼠小脑组织，由B Pessac, D Trisler建立。该细胞具有小神经胶质细胞特征。该细胞为GFAP阳性细胞，除此之外，没有检测到其它神经胶质神经元或小神经胶质细胞的分子标记。

SW 1783细胞系；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

C33A细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：详见相关文献介绍

hUC-MSC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脐带；间充质干细胞

Hs 274.T细胞系；细胞传代方法：1：2传代,每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Pfeiffer细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

FaDu细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：1968年从一位印度下咽骨肿瘤患者的钻孔活组织切片中建立了FaDu细胞株。在建立的细胞株中发现细胞质中含有成束的细丝，并且细胞分界上的桥粒特别突出。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。

NCI-H1435[H1435]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

J82细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：电子显微镜下未观察到桥粒但观察到数目不同的粗面内质网和突出微丝。 含ras (H-ras)癌基因。

LTPA细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

ZYM-SVEC01细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：静脉血管内皮细胞

Nthy-ori3-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。

ECV-304[ECV304,ECV304]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 739.T细胞系；细胞传代方法：1：2—1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：混合型；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 739.T细胞系；细胞传代方法：1：2—1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：混合型；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Bel-7405细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SNU-878细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hela S3细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞是1955年由PuckTT,MarcusPI和CieciuraSJ建系的，含HPV-18序列；角蛋白阳性；可用于与染色体突变、细胞营养、集落形成相关的哺乳动物细胞的克隆分析。

H-4-Ⅱ-E细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

AM-38细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SNB19细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：星形胶质瘤；男性

Jurkat,Clone E6-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

FRH-0201细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胆管癌

DMS-153细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H510细胞系；细胞传代方法：1：3-1：8传代；每周换液2次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：混合生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

AML12细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1668细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：小细胞肺癌

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SJCRH30细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SU-DHL-6细胞系；细胞传代方法：1：3—1：6传代，3—4天换液1次；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HME6细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

RL细胞系；细胞传代方法：每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HMSC-bm细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

C643细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：甲状腺未分化癌；男性

SW579 [SW 579;SW-579]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：甲状腺鳞癌；男性

NCI-H1993[H1993]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SP2/0细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：骨髓瘤；BALB/c

A101D细胞系；细胞传代方法：1：4-1：6传代，2-3天换液1次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

MES-13细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

COLO 320细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 274.T细胞系；细胞传代方法：1：2传代,每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

GCT细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周换液2次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

P388细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

LS 174T细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：该细胞是LS 180结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。它比亲本更易传代，像LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。电镜研究表明，它有丰富的微丝和胞浆黏液素液泡；血清学检测直肠抗原3阳性；p53抗原表达阴性，但mRNA表达阳性；角蛋白阳性；癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表达呈阳性；癌基因k-ras和sis的表达未做检测；可产生IL-10、IL-6和黏蛋白。

HFB细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：皮肤成纤维细胞

A-204[A204]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Panc08.13细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

H125细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Walker256-TC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：乳腺癌；雌性

A-375细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：A375源自一位54岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。

NCI-H460[H460]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

ME-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：急性髓系白血病；男性

YTMLC-90细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺鳞癌；男性

RPPVEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺静脉；血管内皮细胞

CL-11细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

TPC1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：甲状腺乳头状癌；女性

alpha TC1 clone 6细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胰岛素瘤；a细胞；C57BL/6xDBA/2

A427细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

H125细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

L-WRN细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：皮下结缔组织；自发永生；雄性；C3H/An

SW 900[SW-900,SW900]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

H-4-11-E细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Ca9-22细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H211[H211]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SU-DHL-4细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：详见相关文献介绍

WML2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺；成纤维细胞

RBVEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脑静脉；内皮细胞

VMR106细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HCC1428细胞系；细胞传代方法：1：4-1：8传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长，偶尔上皮细胞液泡的形成；细胞背景资料：详见相关文献介绍

RSC-364细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：滑膜细胞

S180细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：小鼠肉瘤

Hi-five|昆虫细胞

RSC-364细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：滑膜细胞

Huh-7.5.1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝癌；男性

Hat-78细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

MRC-5细胞系；细胞传代方法：1：2-1：5传代；每周1-2次；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织，该细胞老化前能传代42~46个倍增时间。

SUM190PT细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：乳腺癌；女性

WML2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺；成纤维细胞

NHLF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺；成纤维细胞

3T3细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

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