"NCI-H69[人小细胞肺癌细胞] 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 3796-70-1 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞生长特性:悬浮生长,聚团 冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 NCI-H69 Cell细胞背景资料:详见相关文献介绍 造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢! 细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2次 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。 细胞形态特性:聚团悬浮 C2C12细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;梭形;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌细胞系的亚株。该细胞分化较快,可形成能收缩的微管,产生特异的肌肉蛋白。在骨形态形成蛋白(BMP-2)的作用下,该细胞可由成肌细胞分化为成骨细胞。检测发现该细胞鼠痘病毒阴性。 MDCK-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MDA-MB-435S细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;细胞形态特性:纺锤形;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:MDA-MB-435S是一种纺锤形的细胞,1976年由其亲本(435)中筛选得到。435是从31岁的转移性乳腺导管腺癌女性患者胸水中分离得到。当用荧光染料对微管蛋白进行染色时亲本细胞显现散布特征(II型)。最近通过cDNA阵列研究表明,亲本(MDA-MB-435)可归入黑素瘤起源。 NCI-H1975细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:这株细胞于1988年七月建株。组织提供者是一位非吸烟人士。 M1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:髓系白血病;SL NCI-H250细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁;细胞背景资料:小细胞肺癌;男性 HCC-1171细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MEF细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。 J774细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:巨噬细胞;BALB/c RD细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,3-4天换液1次;细胞形态特性:梭型和大的多核细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLMA细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Hcaf细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TK10细胞系;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BAEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:主动脉;内皮细胞 MC3T3-E1 Subclone 4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CTX TNA2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:星形胶质细胞;SV40转化;SD SW 982[SW-982,SW982]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 JurkatD,E细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TE7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:食管鳞癌;男性 PBL细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:外周血淋巴细胞 Jiyoye细胞系;细胞传代方法:每周2-3次;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SW 954[SW-954,SW954]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Loo细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 RC-4BC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PC14细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺腺癌;男性 LLC-PK1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肾;自发永生;Hampshire AN3 CA细胞系;细胞传代方法:1:3-1:5传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CEM-SS-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 GC-2 spd细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:精母细胞;SV40转化;BALB/c SHEE细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:食管;上皮细胞 NCI-H2141细胞系;细胞传代方法:3-4天换液1次;细胞形态特性:聚团悬浮;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SW 900[SW-900,SW900]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 c918细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PC-12细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TB 1 LU细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺 TE353.SK细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HFB细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:皮肤成纤维细胞 HECCL-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:子宫内膜癌;女性 SACC-83细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:涎腺腺样囊性癌 LS123细胞系;细胞传代方法:1:4—1:8传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HH细胞系;细胞传代方法:每2-3天换液;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HT-3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 FU-MMT-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:子宫肉瘤;女性 HCCLM3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HFSF细胞系;细胞传代方法:1:3传代,3-4天换液一次;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:北京眼科研究所建系 NCI-H1404[H1404]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TE353.SK细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BEAS-2B细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:从一位非癌个体的正常人支气管上皮病理切片分离出上皮细胞。这些细胞用腺病毒12-SV40病毒杂交病毒感染并克隆。DEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力,并有用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂。细胞角蛋白及SV40抗原染色阳性。 HMSC-he细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H1869细胞系;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 6TCEM细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BT20细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:乳腺导管癌;女性 NCI-H522细胞系;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 T/G HAVSMC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:主动脉血管平滑肌细胞 HSC-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:皮肤鳞癌;男性 H929细胞系;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:NCI-H929细胞是一株人骨髓瘤细胞,主要用于人骨髓瘤疾病研究等。1:3传代,2-3天传一代 Jurkat,Clone E6-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HuO9细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 JB6细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:表皮;自发永生;BALB/c SCC-090细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:舌鳞癌细胞;男性 HL60细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HUP-T4细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TALL-104细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;男性 LA-4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺癌;A/He MEL526细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:黑色素瘤 HONE1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MCF7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 U251 MG细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:U-251 MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。 HMSC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:骨髓间充质干细胞 FL62891细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝;SV40转化;男性 SW756细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HL60细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 "
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