"A101D[人黑色素瘤细胞] 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 73568-25-9 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞生长特性:贴壁生长 冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 A101D Cell细胞背景资料:详见相关文献介绍 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 细胞传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。 细胞形态特性:上皮细胞 SF126细胞系;细胞传代方法:1:3传代;3-4天1次;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞来源于星形胶质细胞瘤;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阴性;可以特异地结合β-内啡肽。 HSAEC1-KT细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺;HGNC-TERT转化;男性 MM96L细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:黑色素瘤;淋巴结转移;女性 Walker/LLC-WRC256细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:腹水癌 B16BL6细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:黑色素瘤;雄性;C57BL/6 KATO Ⅲ细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PC-12细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Malme-3M细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:混合生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BEP2D细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:支气管;上皮细胞;HPV18转化 Pcc4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 sf9细胞系;细胞传代方法:1:5传代;2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:混合生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLTC-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:睾丸间质瘤 MA104细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CTLL-2[CTLL2]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 RAG细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肾癌;BALB/c HCT116细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 639V细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:膀胱癌;男性 SACC83细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 J774细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:巨噬细胞;BALB/c RD细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代,3-4天换液1次;细胞形态特性:梭型和大的多核细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MLMA细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Hcaf细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TK10细胞系;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BAEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:主动脉;内皮细胞 MC3T3-E1 Subclone 4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CTX TNA2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:星形胶质细胞;SV40转化;SD SW 982[SW-982,SW982]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 JurkatD,E细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 A-375[A375]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 DBTRG-05MG细胞系;细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HCT116细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SU-DHL-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:弥漫性大细胞淋巴瘤;胸腔积液转移;女性 NCI-H1876细胞系;细胞传代方法:每周换液2次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 J82细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:电子显微镜下未观察到桥粒但观察到数目不同的粗面内质网和突出微丝。 含ras (H-ras)癌基因。 KM-12-SM细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SW 982[SW-982,SW982]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MKN-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 293A细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚肾;腺病毒5转化;女性 Y3-Ag 1.2.3细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 DRG细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:背根神经细胞 CBRH-7919细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CCD 841 CoN细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠上皮细胞;女性 LUDLU-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 rRMECs细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:视网膜微血管;内皮细胞 NCI-H2023[H2023]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 L2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺; Lewis SW 982[SW-982,SW982]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CAL 27细胞系;细胞传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞1982年由J.Gioanni建系,源自一位56岁白人男性的舌头中倍的病变部位,角蛋白强阳性。 Hp2/o细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 COLO394[COLO394]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H3122细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H526细胞系;细胞传代方法:每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PA12细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 DB细胞系;细胞传代方法:每周换液2-3次;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 RD-ES细胞系;细胞传代方法:1:8传代:每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁和悬浮混合;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Ovary细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NHRF细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肾;成纤维细胞 BERH-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌 ZYM-DIEC02细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小肠上皮细胞 A2058细胞系;细胞传代方法:1:6-1:12传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Co-115细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠腺癌;女性 IPEC-J2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小肠;上皮细胞;自发永生 IAR-20细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝;BDVI CEM-T4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;女性 SU-DHL-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:间变性大细胞淋巴瘤;胸腔积液转移;男性 SW-982细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H2122细胞系;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MEs23.5细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:多巴胺能神经元细胞 NCI-H727细胞系;细胞传代方法:每周换液2次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 JF305细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胰腺癌 VMRC-LCD细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Co-115细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠腺癌;女性 "
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