"DU-145[人前列腺癌细胞] 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 866755-20-6 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分 有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 DU-145 Cell细胞背景资料:详见相关文献介绍 常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。 细胞形态特性:详见细胞说明书 AHH-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:B淋巴细胞;EBV转化 Hs 934.T细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代,;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Hs-746T细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胃癌;左腿肌肉转移;男性 TCCSUP细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代,2-3天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 VLcop细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 RN-c细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MA891细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H1092细胞系;细胞传代方法:随细胞的密度而增加;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 IPEC-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小肠;上皮细胞;自发永生 HAEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:主动脉;内皮细胞 RIN-m细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Karpas-299细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:间变性大细胞淋巴瘤;男性 ECC12细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 IOSE-29细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:卵巢;上皮细胞;女性 B10BR细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:永生化黑素细胞 HCE-2 [50.B1]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:角膜上皮;Ad12-SV40;男性 Kuffer细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H1694[H1694]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 OVCAR4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HepG2-luc细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NUGC-3细胞系;细胞传代方法:1:6传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PLA-802细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 LIXC-011细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H889[H889]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 ECV-304[ECV304,ECV304]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 MUM-2B细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:脉络膜黑色素瘤;女性 BHT101细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:甲状腺癌;女性 TFK-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胆管癌;男性 PC9细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 M21细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:黑色素瘤;女性 H1648细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 ONS-76细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 LAPC4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:前列腺癌;淋巴结转移;男性 DiFi细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结直肠癌;女性 PL-45细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 GCT0404细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:骨巨细胞瘤 NCI-H460[H460]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 TOV-112D细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代,3-4天换液1次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SW620[SW620,SW-620]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SZ95细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 FBM细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 PT-K75细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 201T细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺腺癌;男性 c666-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H1876[H1876]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Sf-9细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 GCT0404细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:骨巨细胞瘤 Anip973细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺腺癌 MKN-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 BMSC/hBMSCs细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:骨髓间充质干细胞 WEHI 164细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HCC2218细胞系;细胞传代方法:每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 22Rv1细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:22RV1是来自异种移植(在阉割引起前列腺癌衰退又在其父亲的雄性激素信赖型CWR22嫁接后复发的小鼠中连续传代)的人前列腺癌上皮细胞系。此细胞系表达前列腺特异抗原。二羟基睾丸脂酮轻微刺激细胞生长,经westernblot检测溶解产物与抗雄性激素受体抗体起免疫反应。EGF刺激细胞生长,但TGFβ-1不能抑制细胞生长。该细胞在裸鼠中成瘤。 3T3-J2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚胎;成纤维细胞 RL细胞系;细胞传代方法:每周换液2-3次;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Hs 604.T细胞系;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HOP-92细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 LTEP-sm细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小细胞肺癌;男性 MC-9细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:肥大细胞;C57BL/6 x A/J QGY-7703细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞系来自35岁女性的肝癌。染色体数目变化大,异倍体多。免疫荧光间接法AFP阳性反应。异体移植能力强。亚显微结构方面,核与细胞质的比例高,大的多形核和多种细胞器亚显微结构改变。在ConA作用下凝集。倍增时间约为20.5小时。用Northernblot方法,未能检测到细胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表达。 SUDHL6细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 WM451细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 HCC2935细胞系;细胞传代方法:1:4-1:6传代,每周2-3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 A427细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 NCI-H1522[H1522]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CFSC-2G细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍 A875细胞系;细胞传代方法:1:3传代;3-4天1次;细胞形态特性:多角形;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:NGF受体阳性。 HCT116细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 Caov-3[Caov3]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 UI-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 SUDHL6细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍 "
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