产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
P2302 |
PreScission Protease |
100U |
158.00元 |
PreScission Protease是一种大肠杆菌中重组表达的带GST标签的人鼻病毒14型的3C蛋白酶(human rhinovirus (HRV)
type 14 3C protease),也称HRV 3C Protease或HRV3C Protease,能在低温条件下(4°C)特异性地识别八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或核心五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切,常用于去除融合蛋白的Glutathione S-transferase (GST)、His或者其它标签的蛋白酶。
建议把GST或His等标签设计在融合蛋白的N端,在GST或His等标签与目的蛋白之间设计加入PreScission Protease 专一性识别与酶切的上述八肽序列,这样在GST或His标签被酶切后,在目的蛋白的N端仅有两个额外的Gly-Pro氨基酸残基,从而限度地减少了对其结构和功能的影响。
本PreScission Protease带有GST标签,特别适合用于GST标签蛋白的在柱酶切。在切割GST标签蛋白的时候,切下的GST标签和PreScission Protease可结合于GST纯化柱(GST-tag Purification Resin)上,而目的蛋白在穿透液中,这样洗脱下来的蛋白中就不会含有GST标签和PreScission Protease,从而极大地方便了目的蛋白的纯化。GST标签酶切去除的详细说明可以参考碧云天的P2251/P2253/P2255 BeyoGold™ GST-tag Purification Resin和P2262 GST标签蛋白纯化试剂盒的说明书。
酶活性单位定义:5°C反应16小时,能够切割100μg GST标签蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
碧云天PreScission Protease酶活性鉴定结果可参考图1。
图1. PreScission Protease切割GST标签蛋白的效果图。含有PreScission Protease识别位点的56kD GST标签蛋白与PreScission Protease进行反应,底物的用量为100μg,酶的用量依次为0、0.25、0.5、1、2、4U,5°C在1X PreScission Buffer中反应16小时后取样进行SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色。酶切产物大小为约30kD的目的蛋白和约26kD的GST标签。
PreScission Protease分子量大小约46 kDa,纯度≥95%。
PreScission Protease储存液组成为:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,10mM EDTA,1mM DTT,50%(v/v) glycerol,pH 8.0。
10X PreScission Buffer组成为:500mM Tris-HCl,1.5M NaCl,10mM EDTA,10mM DTT,pH 7.5。
PreScission Protease的酶切体系中可以兼容1% Triton X-100、Tween-20或NP-40,10mM EDTA和500mM NaCl。
本产品一个包装含有100单位的酶,可用于约10mg带有PreScission Protease识别位点的融合蛋白的切割。
包装清单:
产品编号
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产品名称
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包装
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P2302-1
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PreScission Protease (2U/μl)
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50μl
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P2302-2
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10X PreScission Buffer
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1.2ml
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说明书
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1份
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保存条件:
-20℃ 保存。
注意事项:
100mM ZnCl2、4mM AEBSF和100μM Chymostatin会抑制PreScission Protease的酶活性50%以上。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。