产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
D7233 |
PCR Kit with Taq |
2000次 |
205.00元 |
本PCR试剂盒带有Taq DNA Polymerase、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液,自备模板和引物即可进行PCR反应,适合用于普通的PCR或RT-PCR定性或定量检测,也可以用于不太长的的DNA片段的克隆。
Taq DNA Polymerase简称Taq酶或Taq,是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95℃孵育时的半衰期大于40分钟。Taq酶的分子量为94 kDa。Taq酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,有非常低的5'至3'外切酶活性。由于Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,最终会导致PCR产物的3'末端会产生3'-dA overhangs,即产生带一个A的3'粘端。本Taq DNA Polymerase为recombinant Taq DNA Polymerase,通过大肠杆菌表达纯化获得,和纯化获得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性质相同。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]dTTP。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v)
Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10X PCR Buffer(with Mg2+):100 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl2, 0.8% (v/v) Nonidet
P40。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使Taq酶失活,加入脱氧胆酸钠至0.06%,SDS至0.01%,或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq酶。
试剂盒带有dNTP,该dNTP为dATP、dCTP、dGTP和dTTP的混合物,每种的浓度均为2.5mM。
本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于800个反应,用于20微升的PCR反应体系,足够用于2000个反应。
包装清单:
产品编号
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产品名称
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包装
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D7233-1
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Taq DNA Polymerase (5U/μl)
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1000U
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D7233-2
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10X PCR Buffer (with Mg2+)
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1ml×4
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D7233-3
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dNTP(2.5mM each)
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0.8ml×4
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D7233-4
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6X DNA Loading Buffer
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1ml×2
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说明书
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1份
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保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、BeyoTaq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测,Taq DNA polymerase是选择。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。