| 产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
| D2722-100μg |
pCMV-N-Flag |
100μg |
1086.00元 |
pCMV-N-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Flag质粒的主要信息如下：
|
Feature Nucleotide
|
Position
|
|
CMV promoter
|
1-602
|
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
|
Flag tag
|
679-702
|
|
multiple cloning site
|
705-778
|
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
821-842
|
|
SV40 polyA signal
|
854-1237
|
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
1375-1681
|
|
bla promoter
|
1706-1830
|
|
SV40 promoter
|
1850-2188
|
|
neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2223-3014
|
|
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal
|
3015-3473
|
|
pUC origin
|
3602-4269
|
pCMV-N-Flag质粒的图谱如下：
pCMV-N-Flag的多克隆位点的详细图谱如下：
|
Flag tag
|
|
|
|
SacI M D Y K D D D D K
|
|
651
|
GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
|
TTACAAGGAT
|
|
|
|
|
|
CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
|
AATGTTCCTA
|
|
|
|
|
XmaI PstI
|
|
|
|
|
SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII
|
|
|
701
|
|
CGGATCCAAG
|
CTTCTGCAGG
|
AATTCGATAT
|
CGTCGACAGA
|
|
|
|
|
|
GCCTAGGTTC
|
GAAGACGTCC
|
TTAAGCTATA
|
GCAGCTGTCT
|
|
|
|
XhoI XbaI ApaI
|
|
|
|
|
751
|
TCTCTCGAGT
|
CTAGAACTAG
|
TGGGCCCGGT
|
ACCTTAATTA
|
ATTAAGGTAC
|
|
|
|
|
AGAGAGCTCA
|
GATCTTGATC
|
ACCCGGGCCA
|
TGGAATTAAT
|
TAATTCCATG
|
pCMV-N-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括：
|
Afl II
|
Age I
|
Ahd I
|
Asc I
|
Bbs I
|
Bbv II
|
Blp I
|
|
Bsg I
|
BsiW I
|
BsmB I
|
BspM II
|
BsrG I
|
BssH II
|
Bst1107 I
|
|
BstE II
|
Ear I
|
Eco47 III
|
Eco72 I
|
EcoN I
|
Esp I
|
Fse I
|
|
Nru I
|
PflM I
|
Pme I
|
Pml I
|
PpuM I
|
Psp1406 I
|
Sap I
|
|
Sca I
|
Spl I
|
|
|
|
|
|
pCMV-N-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括：
|
Nde I
|
CA`TA,TG
|
241
|
|
Pvu I
|
CG,AT`CG
|
855
|
|
SnaB I
|
TAC|GTA
|
347
|
|
Bcl I
|
T`GATC,A
|
1009
|
|
Nhe I
|
G`CTAG,C
|
598
|
|
Mun I
|
C`AATT,G
|
1102
|
|
Sac I
|
G,AGCT`C
|
656
|
|
Hpa I
|
GTT|AAC
|
1115
|
|
Sac II
|
CC,GC`GG
|
663
|
|
Mlu I
|
A`CGCG,T
|
1238
|
|
BstX I
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
664
|
|
Dra III
|
CAC,NNN`GTG
|
1468
|
|
Not I
|
GC`GGCC,GC
|
669
|
|
Sfi I
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2127
|
|
PspA I
|
C`CCGG,G
|
706
|
|
BseR I
|
GAGGAG 16/14
|
2170
|
|
Xma I
|
C`CCGG,G
|
706
|
|
Stu I
|
AGG|CCT
|
2173
|
|
Srf I
|
GCCC|GGGC
|
708
|
|
Cla I
|
AT`CG,AT
|
2192
|
|
Sma I
|
CCC|GGG
|
708
|
|
Kas I
|
G`GCGC,C
|
2351
|
|
BamH I
|
G`GATC,C
|
713
|
|
Nar I
|
GG`CG,CC
|
2352
|
|
Hind III
|
A`AGCT,T
|
719
|
|
Ehe I
|
GGC|GCC
|
2353
|
|
Pst I
|
C,TGCA`G
|
729
|
|
Bbe I
|
G,GCGC`C
|
2355
|
|
EcoR I
|
G`AATT,C
|
731
|
|
Msc I
|
TGG|CCA
|
2434
|
|
EcoR V
|
GAT|ATC
|
739
|
|
Tth111 I
|
GACN`N,NGTC
|
2470
|
|
Sal I
|
G`TCGA,C
|
743
|
|
BsrD I
|
GCAATG, 8
|
2585
|
|
Acc I
|
GT`MK,AC
|
744
|
|
Bsp1286 I
|
G,DGCH`C
|
2655
|
|
Bgl II
|
A`GATC,T
|
749
|
|
Rsr II
|
CG`GWC,CG
|
2868
|
|
PaeR7 I
|
C`TCGA,G
|
755
|
|
BsiC I
|
TT`CG,AA
|
3034
|
|
Xho I
|
C`TCGA,G
|
755
|
|
BstB I
|
TT`CG,AA
|
3034
|
|
Xba I
|
T`CTAG,A
|
761
|
|
Bsa I
|
GGTCTC 7/11
|
3341
|
|
Spe I
|
A`CTAG,T
|
767
|
|
HgiE II
|
ACCNNNNNNGGT-1/13
|
3681
|
|
Bsp120 I
|
G`GGCC,C
|
773
|
|
ApaL I
|
G`TGCA,C
|
3956
|
|
Apa I
|
G,GGCC`C
|
777
|
|
|
|
|
pCMV-N-Flag质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-Flag的全序列信息：D2722 pCMV-N-Flag-seq.txt
包装清单：
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
D2722-1μg
|
pCMV-N-Flag
|
1μg
|
|
D2722-001μg
|
pCMV-N-Flag
|
100μg
|
|
—
|
说明书
|
1份
|
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。