产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
SC4359-10mM |
Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂) |
10mM |
138.00元 |
化学信息:
化学名
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5-(1H-indol-3-ylmethyl)-3-methyl-2-sulfanylideneimidazolidin-4-one
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简称
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Necrostatin-1
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别名
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Nec-1 compound, Nec-1, Necrostatin 1, Necrostatin1
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中文名
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N/A
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化学式
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C13H13N3OS
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分子量
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259.33
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CAS号
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4311-88-0
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纯度
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98%
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溶剂/溶解度
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Water<1mg/ml; DMSO51mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml
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溶液配制
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5mg加入1.93ml DMSO,或者每2.59mg加入1ml DMSO,配制成10mM溶液。SC4359-10mM用DMSO配制。
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生物信息:
产品描述
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Necrostatin-1是一种特异性RIP1抑制剂,抑制TNF-α诱导的细胞坏死,在293T细胞中EC50为490nM。
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信号通路
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Apoptosis
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靶点
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RIP1
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IC50
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490nM(EC50)
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体外研究
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Necrostatin-1(1-100μM)抑制过表达和内源性的RIP1发生自磷酸化。RIP1是初级细胞靶点,负责Necrostatin-1的抗细胞坏死活性。Necrostatin-1有效抑制多种类型细胞触发的坏死性细胞死亡。Necrostatin-1作为细胞坏死的小分子抑制剂,作用于jurkat细胞,抑制RIP激酶的诱导细胞坏死,抑制TNF-α诱导的细胞坏死,EC50为490nM。
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体内研究
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N/A
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临床实验
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N/A
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特征
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Necrostatin-1是抑制细胞坏死的有力工具。
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相关实验数据(此数据来自于公开文献,碧云天并不保证其有效性):
酶活性检测实验
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方法
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RIP1的磷酸化需要其激酶活性。FLAG标记的野生型(WT)或RIP1(K45M)突变体失活激酶的表达结构转染到293T细胞中,在有[γ-32P]ATP存在时,RIP1激酶实验在30℃下进行30分钟。样品进行SDS-PAGE,通过放射自显影可观察到RIP1带。对放射性带的相对强度进行量化,并显示比率。在激酶反应的同时,珠样本使用anti-RIP1抗体进行Western Blot分析,确保与激酶反应中等量的蛋白。
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细胞实验
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细胞系
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Jurkat,BALB/c 3T3,SV40-转化的MEF,L929
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浓度
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0.01-100μM
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处理时间
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N/A
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方法
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细胞接种在96孔板中(白色板进行发光检测;黑色板进行荧光检测;空白板进行MTT实验)贴壁细胞按每孔5000-10000个细胞的密度接种,悬浮细胞按每孔20000-50000个细胞的密度接种,孔中含100μl合适的无酚红培养基。温育后,使用如下方法之一测定细胞存活率。ATP实验中,使用购买的发光试剂盒,并使用Wallac Victor II酶标仪分析发光值。Sytox实验中,细胞与1μM Sytox Green试剂在37℃下温育30分钟,然后进行荧光读数。随后,增加5μl 20% Triton X-100溶液到每孔中,产生溶解,细胞37℃下温育1小时,然后进行二次读数。Triton处理前和后,计算值的比率。MTT实验,使用CellTiter 96 AQueous非放射性细胞增殖检测试剂盒。PI排除实验中,加入2μg/ml PI到培养基中,立即使用FACSCalibur分析样品。PI-膜联蛋白V实验中,使用ApoAlert Annexin V-EGFP凋亡试剂盒。进行DioC6染色,细胞与40nM DiOC6在37℃下温育30分钟,洗涤一次,使用FACSCalibur分析。ROS分析中,细胞与5μM Dihydroethidium在37℃下温育30分钟,洗涤一次,使用FACSCalibur分析。
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动物实验
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动物模型
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N/A
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配制
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N/A
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剂量
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N/A
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给药方式
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N/A
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参考文献:
1. Degterev A, et al. Nat Chem Biol. 2008, 4(5), 313-321.
2. Degterev A, et al. Nat Chem Biol. 2005, 1(2), 112-119.
包装清单:
产品编号
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产品名称
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包装
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SC4359-10mM
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Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SC4359-5mg
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Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂)
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5mg
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SC4359-25mg
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Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂)
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25mg
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—
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说明书
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1份
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保存条件:
-20℃保存,至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存,至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂,建议分装后-80℃保存,预计6个月内有效。
注意事项:
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。